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EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟

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更新時間:2017-07-19 14:44:14瀏覽次數:475次

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EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟詳細說明書:

EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
INDOXYL-B-DGLUCOSIDE吲哚-beta-D-葡萄糖苷25MGFROZEN

(*-*溶液)

雷瑣辛酸,英文名或英文縮寫:BRA,級別:高純,99%,規(guī)格:50毫克

雙隊肖基酚鱗醋內(-20°C) BIS(4-nitnOPHqNYL)PHOSPHORIC cCID wo7ium ScLT 4043-96-3

正十二醇,英文名或英文縮寫:Dodecanol,級別:BR99%,規(guī)格:5
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(豬脾)/去氧細胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸水解酶/無核糖核酸酶/脫氧核糖核酸去聚合酶/脫羥核糖核酸酶(豬胰)/除氧細胞核酸酶(豬胰) /DNase II BR,300U/mg 100毫克 國產/進口

Ferulicacid3-(4-羥基-3-甲氧基本基)-2-丙烯酸5AR,99%

(本基異青醋酯)-- Polymqthylqnq polyphqnyl polyisocycnctq 9016-87-9

鹽酸鹽/鹽酸//鹽酸二基乙烷/乙撐二胺/Ethylenediamine
9-50毫克保存:-20

7775-41-9扶化銀Silver fluoride

3-Bromo-1-fluoronepxtxelene 13772-59-3

2-硝基噻吩 2-Nitrothiophene ,98 % 609-40-5 5G 多肽試劑

霍亂雙糖鐵瓊脂shēng huà shì jì容量:28150毫升
人小氣管上皮細胞(HSAEpiC)(5×105 )

人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2

CL-0287M14(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C 大鼠內臟脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

M1 小鼠白血病細胞

PLA2G7 Others Human PLA2G7 / PAFAH 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2

人小氣管上皮細胞(HSAEpiC)(5×105 )

CL-0287M14(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C 大鼠內臟脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

M1 小鼠白血病細胞

PLA2G7 Others Human PLA2G7 / PAFAH 人細胞裂解液 (陽性對照)
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL操作步驟VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

人心臟成纖維細胞( HCF) ( 5×105 )

小鼠胚胎成纖維細胞;MEF 小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞 Human

T-106AIV型膠原酶(10mL酶解緩沖液)1mL

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