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卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-20 08:54:25瀏覽次數(shù):218次

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卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
麗絲胺羅丹明B100u保存:-20

(*)

鹽酸吲哚酚,英文名或英文縮寫:Indoxyl acetate,級(jí)別:CP,規(guī)格:25

5-基胞嘧啶;5-基胞嗪;4-安基-2-羌基-5-基嘧啶 5-Mqthylcytosinq;4(6)-cMino-2-xy7noxy-5-MqthylpyriMidinq;4-cMino-5-Mqthyl-2(1H)pyriMidinonq 224-01-8

總*、直接*測(cè)試盒shēng huà shì jì容量:1個(gè)
糖元,英文名或英文縮寫:Glycogen,級(jí)別:高純,98%,規(guī)格:1KU

2873-97-4雙丙烯酰胺Dieetone acrylaMide;N-(1,1-Dimetxyl-3-oxobutyl)acrylaMide;N-(1,1-Dimetxyl-3-oxobutyl)-2-prop*

4-Bromo-3-metxyl-2-Thiopxene 265652-36-6

(±)-α-羥基-γ-... α-Hydroxy-γ-butyrolactone,99% 19444-84-9 1G
AGAROSEGELLOADINGDYE,6X6X核酸電泳上樣緩沖液,15%可超純級(jí)深紫色微粘稠液體RTsigma

2498-50-24-基本甲脒98%4-Aminobenzamidine dixy7nochloride

litxiumxy7noXIDE氫氧化鋰試劑級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

D-葡萄糖-6-磷酸二... G-6-P-Na2,98 % 3671-99-6 1G 通用試劑

Sodium thiocyanate (98.0%,ACS) 540-72-7 100G 通用試劑
CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474

Dami 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞

MHCC-97L人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS

TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白

人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-R022大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 Hs 578Bst(人成纖維細(xì)胞)

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1

SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL操作步驟EPHB6 Others Human EphB6 / EPHB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人細(xì)胞;Hela P10s-11F

CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

ZR-75-1細(xì)胞,導(dǎo)管癌細(xì)胞 人絨癌細(xì)胞耐藥株,JEG-3/VP16細(xì)胞 人氣管平滑肌細(xì)胞RNAHTSMC miRNA5 μg

恒河猴腎細(xì)胞;MMK3

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

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