Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg操作步驟詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：

Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開(kāi)即用，用戶(hù)不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿(mǎn)足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
硼酸500克

StarchSoluble 100g/250g/1kg原裝 Sigma S9765

三羥甲基基甲烷碳酸鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克

隊(duì)肖基本-α-D-葡萄糖苷(-20℃) 4-nitnOPHqNYL-cLPHc-D-GLUCOPYRcNOSIDq 3767-8-0

蚯蚓酶shēng huà shì jì容量：25克
酸性藍(lán)147，英文名或英文縮寫(xiě)：Xylene cyanole FF，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克

590-18-1順-2-丁烯 ≥99%CIS-2-BUTENE

4-Bromo-1-metxylnepxtxelene 6627-78-7

2-(二叔丁基膦)聯(lián)苯 2-(Di-tert-butylphosphino)biphenyl,97% 224311-51-7 1G 表面活性劑

GDX　101(聚二烯本多孔小球) Nc
AMMONIUMCHLORIDE錄化ACS級(jí)白色顆粒粉末RTsigma

那拉曲坦混合物Naratriptan Resolution Mixture;

次*10克

4-基安替吡啉 4-Aminoantipyrine, ≥99% 1983-7-8 10G 通用試劑

N-異丙基苯胺 N-Isopropylaniline,97% 768-52-5 1G 通用試劑
CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML

人胃癌細(xì)胞;MKN-45

小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02 透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human

PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML

CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胃癌細(xì)胞;MKN-45

小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02 透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human

PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg操作步驟小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NCI-H716 [H716]人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白

J82 人膀胱移行細(xì)胞癌