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更新時間:2017-07-20 09:54:21瀏覽次數(shù):144次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Doxorubicin(Adriamycin) *100μL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
Doxorubicin(Adriamycin) *100μL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Doxorubicin(Adriamycin) *100μL操作步驟詳細說明書:
Doxorubicin(Adriamycin) *100μL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
甲基叔丁基醚500克
(50X)溶液
氣溶膠OTshēng huà shì jì容量:25克
4-肖基本酰錄;隊肖基本酰錄;錄化隊肖基本酰 4-nitnobqnzoyl chloridq 2001/4/3
偶氮胂Ⅲshēng huà shì jì容量:RT5克
酸鈉1克保存:-20℃
(易-2)
甜蜜素shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
5′-核苷酸酶 5′-Nucleotidase human 9027-73-0 500U 通用試劑
蒙脫土 K-CcTcLYST 1318-93-0
AMMONIUMPHOSPHATE,DIBASIC嶙酸氫二ACS級白色結(jié)晶粉末RTsigma
32435-46-4磷酸氫二(甲基丙烯酰氧乙基)酯BIS(2-metxACRYLOXYetxyl) PHOSPHATE
metxyl-2-bromothiopxene-3-carboxylate 76360-43-5
磷酰基乙酸*酯 Trimethyl phosphonoacetate,98% 5927-18-4 25G 通用試劑
Spermidinetrixy7nochlorideN-(3-丙基)-1,4-丁
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小氣道上皮細胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg
PC-3 人前列腺癌細胞
CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人海馬神經(jīng)元
人正常肝細胞;L-02 人結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人小氣道上皮細胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細胞裂解液 (陽性對照)
PC-3 人前列腺癌細胞
CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人海馬神經(jīng)元
人正常肝細胞;L-02 人結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
Doxorubicin(Adriamycin) *100μL操作步驟人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人小腦顆粒細胞*培養(yǎng)基 100mL
人前列腺平滑肌細胞HPSMC
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H123人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
PANC-1, 人胰腺癌細胞
HUVEC 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞
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