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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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SNP(NO 供體 )1g操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:23:08瀏覽次數(shù):228次

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SNP(NO 供體 )1g操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

SNP(NO 供體 )1g操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
SNP(NO 供體 )1g操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
SNP(NO 供體 )1g操作步驟詳細說明書:

SNP(NO 供體 )1g操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
月示胨128℃,避光

(三羥甲基基甲烷)

孔雀綠草酸鹽shēng huà shì jì容量:25

4-巰基本加醋 4-Mqrccptobqnzoic ccid 1074-36-8

膠回收kitshēng huà shì jì容量:RT500
四氧化三錳shēng huà shì jì容量:100

63903-51-5植酸鋅Zinc Phytate

5-(2-furyl)thiopxene-2-carboxylic acid 868755-62-8

原丁酸*酯 Trimethyl orthobutyrate,97.0% 43083-12-1 5ML 通用試劑

蘋果醋脫輕酶(-20) Nc
APAAP:堿嶙酶復合物shēng huà shì jì容量:80/

148-53-82-羥基-3-甲氧基3-metxoxysalicylaldehyde

N-xy7noxy-thiopxene-2-carboxamidine 53370-51-7

己酸乙酯 Ethyl hexanoate,98% 123-66-0 100G 通用試劑

G418SULFATEG418鹽超純級白色粉末COLDsigma
LSAMP Others Human LSAMP 人細胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜細胞;WISH

HCT 116 人結(jié)腸癌細胞

OS-RC-2人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白

大鼠垂體細胞(RPC)(1×106) A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 Human
人羊膜細胞;WISH

IL17RB Others Human IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0343HA(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2

P3-NS-1/1-Ag4.1細胞,骨髓瘤細胞 T細胞白血病細胞,6T-CEM細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9402

幼蚊細胞;C6/36

SELE Others Human E-Selectin / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照)
SNP(NO 供體 )1g操作步驟FN1 Others Human Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712

NRG1 Others Canine NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照)

SW 13細胞,腎上腺皮質(zhì)瘤細胞 人子細胞,C-33A細胞 人骨骼肌成肌細胞總RNAHSkMM tRNA

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

HCT116, 人結(jié)直腸癌細胞

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