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人 NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:37:23瀏覽次數(shù):482次

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人 NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟詳細說明書:

NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
MCPC培養(yǎng)基750毫升28

TryptoseBroth 500g原裝/500g原裝 BD 262200

硅酸鉀shēng huà shì jì容量:RT25

GMMA-庚內(nèi)酯 98% 4-Hqptcnolidq 102-1-2

甘酸鈉shēng huà shì jì容量:RT,避光5
四氮唑藍1公斤

149-87-1DL-焦谷酸;DL-4-吡咯完酮-5-羧酸;DL-焦性麩質(zhì)酸;DL-焦性膠酸DL-PyroglutaMic acid;DL-2-Pyrrolidone-5-carboxylic acid;DL-5-Oxo-2-pyrrolidine carboxylic acid

HCTISSUEFIXATIVEA100/E組織固定劑組織學級100/CSRT

2,4-二巰基嘧啶 2,4-Dithiopyrimidine,98% 2001-93-6 1G 通用試劑

ATP酶測試盒(
Azone*1AR99.5%

7601-90-3高錄酸(*)¤()PERCHLORIC ACID

Phosphomolybdicacidhydrate十二鉬嶙酸25GR,98%

苯甲脒 Benzamidine hydrochloride hydrate,99% 618-39-3 5G 通用試劑

糠基流醇 Furfuryl mqrccptcn 1998--
HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人真皮微血管內(nèi)皮細胞cDNAHDMEC cDNA

KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22

ZR-75-30細胞,癌細胞 人食管癌細胞,TE-11細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6

ERBB2 Others Human ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內(nèi)皮細胞cDNAHDMEC cDNA

HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22

ZR-75-30細胞,癌細胞 人食管癌細胞,TE-11細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6

ERBB2 Others Human ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照)
NK 細胞分離液 1.062200mL操作步驟人卵巢微血管內(nèi)皮細胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2,人成骨肉瘤細胞 Human

人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;NTERA-2

Spike Others Human coronavirus 人冠狀病毒 spike glycoprotein (aa 1-760) 人細胞裂解液 (陽性對照)

Caco-2人結(jié)直腸腺癌細胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS

TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標簽)

FaDu 人咽鱗癌細胞

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