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更新時間:2017-09-06 10:41:49瀏覽次數:210次
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產品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng) | 貼壁生長 | 3-5天 |
細胞名稱 人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 張氏肝細胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應用于病毒學、生化和惡性腫瘤相關的轉移研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng)復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人神經系統(tǒng)周邊細胞 (HPNC)( 5×105 )
615小鼠癌瘤株;Ca761
T24, 人膀胱癌細胞
人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照)
LM-8 小鼠骨肉瘤
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株
人脊髓星形膠質細胞(HA-sp)(1×106)
人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照)
615小鼠癌瘤株;Ca761
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M021小鼠胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
EC97076細胞,人食管癌細胞 人神經母細胞瘤細胞,IMR-32細胞 狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82
Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CD34 Others Human 人 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照)
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser332) 磷酸化轉錄因子E2F-1抗體 規(guī)格 0.1ml
纖維素膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Whatman
ZNF281 英文名稱: 鋅指蛋白281抗體 0.2ml
DEF6/IBP 英文名稱: 干擾素調節(jié)因子4結合蛋白抗體 0.2ml
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
Ezrin/Radixin 埃茲蛋白(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
丁酰*脂酶抗體(N端) Anti-BCHENT 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1142) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
馬血清 100ml Gibco
ZNF772 英文名稱: 鋅指蛋白772抗體 0.2ml
DOK1 英文名稱: D酪酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml
丁酰*脂酶抗體(N端) Anti-BCHENT 0.1ml
人張氏肝細胞;Chang liver培養(yǎng)ZBTB12 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB12抗體 0.2ml
phospho-Dishevelled 2 (Thr224) 英文名稱: 磷酸化蓬亂蛋白2抗體 0.1ml
水通道蛋白-1抗體 Anti-AQP1 0.1ml
Anti-CEA/HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-ELk1(Thr417) 磷酸化細胞轉錄因子ELK1抗體 規(guī)格 0.1ml
E2F4 轉錄因子E2F-4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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