神經(jīng)干細(xì)胞原代培養(yǎng)的取材及步驟,明確體外定向誘導(dǎo)分化條件,為進(jìn)一步神經(jīng)干細(xì)胞移植相關(guān)實(shí)驗(yàn)提供基礎(chǔ)條件.

方法 新生24 h昆明種小鼠無菌條件下冰上取大腦組織,經(jīng)機(jī)械分離加*消化吹打后,加入含有堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和B27的DMEM/F12培養(yǎng)基中培養(yǎng);

加入不同濃度胎牛血清誘導(dǎo)其分化,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)行巢蛋白、膠質(zhì)纖維酸性蛋白、微管相關(guān)蛋白2染色,對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞鑒定.

結(jié)果 新生小鼠提取神經(jīng)干細(xì)胞可形成神經(jīng)球,并穩(wěn)定增殖傳代,經(jīng)誘導(dǎo)可定向分化為神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞.

結(jié)論 新生小鼠較胎鼠取材簡(jiǎn)單,可培養(yǎng)高質(zhì)量神經(jīng)干細(xì)胞,血清濃度同向星型膠質(zhì)細(xì)胞方向的分化概率呈正相關(guān).