小鼠 ELISA 檢測試劑盒操作及方案

  小鼠 ELISA試劑盒是夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）?公司的理念是：以誠信為本，努力打造品牌，為您提供的售中、售后服務(wù)。.已知小鼠 ELISA死因子濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。本公司的產(chǎn)品良好及服務(wù)。先將小鼠 ELISA和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中小鼠 ELISA子的濃度呈比例關(guān)系。

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入50ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案

  標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）  

A 360 360 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

B 180 180 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

C 90 90 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

D 45 45 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

E 22.5 22.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

F 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

G 樣本 樣本 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品