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TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-08-11 15:32:12瀏覽次數(shù):89次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸
英文名稱:TM3(mouse LFSdigcells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0792
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

VE ELISA Kit  大鼠*    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit  小鼠生長激素釋放多肽    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Jo1/HRS(Human Jo-1 Antibody) ELISA Kit  人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VA ELISA Kit  大鼠*    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit  人抗核糖核蛋白抗體    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit  小鼠凝溶膠蛋白    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Beta-TG ELISA Kit  大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PF-4/CXCL4 ELISA Kit   大鼠血小板因子4    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit  小鼠核因子κB受體活化因子配基    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody) ELISA Kit  人抗天然脫氧核糖核酸抗體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit  小鼠血栓前體蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
DHT ELISA Kit  大鼠雙氫睪酮    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ENA-Ab(Human anti-extractable nuclear antigen antibody) ELISA Kit  人抗可提取核抗原抗體    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
DNP-Ab(Human deoxyribonucleic protein antibody) ELISA Kit  人抗脫氧核糖核蛋白抗體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CTGF ELISA Kit  大鼠結(jié)締組織生長因子    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠*釋放激素    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit  小鼠抑制素B    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AsAb ELISA Kit  大鼠抗抗體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit  人抗肌動(dòng)蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)保存運(yùn)輸HIT(Human heparin associated antibody) ELISA Kit  人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PTH ELISA Kit   大鼠甲狀旁腺激素    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促甲狀腺素釋放激素    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促腎上

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