產(chǎn)品名稱：A875(人黑色素瘤細(xì)胞)圖片
英文名稱：A875(human melanomacells)
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0812
A875(人黑色素瘤細(xì)胞)圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
A875(人黑色素瘤細(xì)胞)圖片收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Kit  小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit  人髓鞘堿性蛋白抗體    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PKB ELISA Kit  大鼠蛋白激酶B    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GATA4Mouse GATA binding protein 4) ELISA Kit  小鼠GATA結(jié)合蛋白4    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit  人組織多肽抗原    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human lung cancer Marker ELISA Kit  人肺癌標(biāo)志物    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
IP-10/CXCL10(Mouse interferon-inducible protein 10) ELISA Kit  小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
sIgA ELISA Kit  大鼠分泌型免疫球蛋白A    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
human gastric carcinoma Marker ELISA Kit  人胃癌標(biāo)志物    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
HO-2 ELISA Kit  大鼠血紅素氧合酶2    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit  小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT  小鼠氧化低密度脂蛋白抗體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Cr ELISA Kit  大鼠骨膠原交聯(lián)    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit  人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
C I CP ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit  人胰腺癌標(biāo)志物CA242    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit  小鼠抗平滑肌抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit  人胃腸癌標(biāo)志物CA199    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit  小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30    進(jìn)口/原A875(人黑色素瘤細(xì)胞)圖片裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
DPD ELISA Kit  大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PY ELISA Kit  大鼠吡啶交聯(lián)物    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
NF-KapB p65(Mouse nuclear factor-KapB p65) ELISA Kit  小鼠核因子κB亞基p65親和肽    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit  人癌標(biāo)志物-CA153    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OPN ELISA Kit  大鼠骨橋素    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T