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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-11 16:21:10瀏覽次數(shù):85次
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適用領域 | 科研 |
產品名稱:EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)運輸
英文名稱:EA.hy926 (human umbilical vein cell fusion cell)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產品貨號:FS-X0829
EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得。
EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結合蛋白2 96T
IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結合蛋白1 96T
ADRA1A ELISA Kit 大鼠腎上腺素能a1A受體 96T
IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16 96T
IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 小鼠白介素3 96T
IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子2 96T
CR ELISA Kit 大鼠鈣結合蛋白 96T
IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子1 96T
HABP ELISA Kit 大鼠透明質酸結合蛋白 96T
IL-4(Mouse Interleukin 4) ELISA Kit 小鼠白介素4 96T
IL-5(Mouse Interleukin 5) ELISA Kit 小鼠白介素5 96T
BMP-6 ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6 96T
IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干擾素 96T
LN(Mouse Laminin) ELISA Kit 小鼠層連蛋白/板層素 96T
大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit 大鼠淋巴細胞因子 96T
ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人細胞間粘附分子1 96T
HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝細胞生長因子 96T
M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞集落刺激因子 96T
mALB ELISA Kit 大鼠微量蛋白 96T
MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞來源的趨化因子 96T
AcSDKP ELISA Kit 大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-* 96T
GM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子 96T
EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)運輸GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質細胞系來源的神經營養(yǎng)因子 96T
PA-IgG/M/A ELISA Kit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A 96T
RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit 小鼠正常T細胞表達和分泌因子
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