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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-11 16:30:10瀏覽次數(shù):175次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)價格
英文名稱:MKN-28(high metastatichuman gastric cancercells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0845
MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)價格的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)價格培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
間黏附分子3結(jié)合非整合素分子 96T
Pla zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷 96T
MCP-4/CCL13(Human monocyte chemotactic protein 4) ELISA kit 人單核細(xì)胞趨化蛋白4 96T
Pla Gibberellic Acid,GA ELISA Kit 植物赤霉素 96T
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 96T
Mouse Ai-nuclear Aibody,ANA ELISA Kit 小鼠抗核抗體 96T
(P I NP)ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽 96T
LTD4(Human leukotriene D4) ELISA Kit 人白三烯D4 96T
(ADAM9)ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
KLH ELISA Kit 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白 96T
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T
N-Cad(Human Neural-Cadherin) ELISA kit 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白 96T
phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 兔血管生成素2 96T
大鼠c-fos ELISA Kit 大鼠c-fos 96T
ADAM9 ELISA Kit 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor) ELISA Kit 人肝素結(jié)合性表皮生長因子 96T
Pla growth hormone,GH ELISA Kit 植物生長激素 96T
Pla phosphatidic acid,PA ELISA Kit 植物凝脂酸 96T
Mouse oxidizided glutathione,GSSG ELISA Kit 小鼠氧化型* 96T
大鼠c-jun ELISA Kit 大鼠c-jun ELISA Kit 96T
ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit 人紅細(xì)胞刺激因子 96T
ANG- II (Rat angiotension II ) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ 96T
Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit 小鼠還原型* 96T
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 兔可溶性凋亡相關(guān)因子 96T
MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)價格TRANCE(Human TNF related activation induced cytokine) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子 96T
sIL-6R ELISA Kit 大鼠可溶性白介素6受體 96T
Pla Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit 植物吲哚乙酸 96T
PYD ELISA Kit 大鼠吡啶酚 96T
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