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產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
產品名稱:輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/48樣
規(guī)格:50管/48樣
測試方法:高效液相色譜法
測定意義:輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,NAD是糖酵解和TCA循環(huán)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態(tài),NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,NAD降解產物具有非常重要的調控作用。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/48樣主要特點為:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度**是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/48樣(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。咨詢!
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速.
注意事項:
1.檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩(wěn)定20分鐘左右。
2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。
3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩(wěn)定。
4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數據的準確性。
5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
6.實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
操作流程:
1. 植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒進口國產從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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