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細(xì)胞轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將外源性基因（如 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等）導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強(qiáng)或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。隨著基因和蛋白功能的深入研究，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為科研實(shí)驗(yàn)中常用的技術(shù)手段之一。研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來(lái)越廣泛。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短，可以分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。那么在細(xì)胞轉(zhuǎn)染中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別？一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧！
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染（transient transfection）：指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細(xì)胞分裂過(guò)程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。目前，由于各種轉(zhuǎn)染試劑的發(fā)明，哺乳動(dòng)物細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染已經(jīng)用于生產(chǎn)具有適當(dāng)折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組，因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其子代細(xì)胞的基因組中會(huì)同時(shí)保留轉(zhuǎn)染的DNA。由于穩(wěn)轉(zhuǎn)效率較低，因此選用有效地轉(zhuǎn)染策略和篩選方法很重要。
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