我們在細胞培養(yǎng)時大部會以貼壁的形式生長(除了取自血、脾或骨髓的細胞),使用的wan全培養(yǎng)基中的血清,含有許多帶陽性電荷的促細胞附著因子(層黏連蛋白 Laminine、纖維鏈接蛋白 Fibronectin 等胞外基質(zhì)),能幫助細胞附著于帶陰性電荷的底物上,并形成鍵結(jié)、貼壁伸展。也就是所謂的細胞消化,常見的細胞消化方法有哪些?一起來學習一下吧!
機械消化法
直接用液體吹打或用刮刀,施予外力讓細胞與培養(yǎng)底物分離;適用于貼壁性弱的細胞傳代,但相較于其它消化方法,這種外力無法量化控制,細胞分散效果差,且可能會造成大量細胞破損,使內(nèi)容物釋放到培養(yǎng)基,進而影響細胞傳代狀態(tài)。
離子螯合法
細胞膜表面蛋白大多需要鈣、鎂離子來維持與胞外基質(zhì)的穩(wěn)定鍵結(jié),當然也包含各種黏附蛋白(例:整合素、鈣黏著蛋白、橋粒等),螯合劑會在不破壞細胞膜表面蛋白的狀況下,抽離這些離子,使黏附蛋白失活而減少細胞-細胞間及細胞-底物間的連接作用,讓細胞較容易在施予外力時,脫離培養(yǎng)底物并促進細胞分散。
0.02% EDTA是細胞傳代常用的離子螯合劑,在37℃作用效果佳(消化較敏感的細胞可在4℃作用),適用于消化一般貼壁性細胞或細胞表面標記實驗細胞。
酶消化法
用蛋白水解酶消化連接細胞及培養(yǎng)底物的蛋白質(zhì),適用于消化貼壁性稍強的細胞。
以上就是常見的三種關(guān)于細胞消化的方法,如果你想了解更多請咨詢百奧創(chuàng)新客服~
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