質(zhì)粒是在細菌和其他細胞中發(fā)現(xiàn)的一種小型、環(huán)狀DNA 分子。通常只攜帶少量基因,特別是一些與抗生素耐藥性有關(guān)的基因;另外質(zhì)粒可以在不同的細菌細胞之間傳遞因為質(zhì)粒分子本身具有復制功能的遺傳結(jié)構(gòu),可攜帶一些遺傳信息,并且其自我復制能力和攜帶遺傳信息能力非常強大,經(jīng)過基因表達后可使其宿主細胞表現(xiàn)相應的性狀,所以質(zhì)粒常被用作基因載體,在分子生物學、生物化學與細胞生物學等學科中得到廣泛的應用。那么質(zhì)粒有哪些分類和用途?一起來學習下吧!
Cloning Plasmids 克隆質(zhì)粒:用于促進 DNA 片段的克隆??寺≥d體往往非常簡單,通常只包含細菌抗性基因、復制起點和 MCS。
Expression Plasmids 表達質(zhì)粒:用于基因表達(基因功能的研究)。表達載體必須包含啟動子、轉(zhuǎn)錄終止子序列和插入基因。啟動子驅(qū)動插入DNA 轉(zhuǎn)錄生成RNA,合成的RNA上的終止子序列發(fā)出停止轉(zhuǎn)錄過程的信號。表達載體可以通過增強子序列增加蛋白質(zhì)或RNA的產(chǎn)量。表達載體可以在各種細胞類型(哺乳動物、酵母、細菌等)中驅(qū)動表達,這在很大程度上取決于用于啟動轉(zhuǎn)錄的啟動子。
Gene Knock-Down Plasmids 基因敲減質(zhì)粒:用于減少內(nèi)源基因的表達。通過表達靶向目的基因 mRNA的shRNA來實現(xiàn)。這些質(zhì)粒具有可以驅(qū)動短 RNA 表達的啟動子。
Genome Engineering Plasmids 基因工程質(zhì)粒:用于靶向和編輯基因組。通常使用 CRISPR 技術(shù)完成。
Reporter Plasmids 報告質(zhì)粒:用于研究遺傳元件的功能。這些質(zhì)粒包含一個報告基因(例如,熒光素酶或GFP),可提供遺傳元件活性的讀數(shù)。
Viral Plasmids 病毒質(zhì)粒:通過修飾的病毒基因組,有效地將遺傳物質(zhì)遞送到靶細胞中??梢允褂眠@些質(zhì)粒來制造病毒顆粒,例如慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、AAV 或腺病毒顆粒,從而高效感染靶細胞。
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