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ELISA試劑盒實驗時怎樣下降實驗背景

來源:上海江藍純生物有限公司   2017年06月02日 09:40  

如今由于ELISA試劑盒檢查的便利,許多尋常百信也會采購ELISA試劑盒來做試驗,ELISA試劑盒的品種許多,有人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒等各種,不過在大家的心目中,現(xiàn)在仍是進口ELISA試劑盒比國產(chǎn)ELISA試劑盒要好。不管是進口的仍是國產(chǎn)的ELISA試劑盒,在試驗的時分,咱們老是不行忽略試驗的布景影響,那么怎樣才能把試驗布景影響下降到zui低呢?要從以下幾個方面入手:
1.洗刷:看似無聊的過程,其實是試驗的重中之重,由于假如未的資料(如非特異的抗體或檢查試劑)殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。如有必要,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異反響。假如布景過高,而您置疑洗刷不夠時,能夠測驗添加洗刷次數(shù)。
2.ELISA試劑盒密封:關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的位點。這就下降了可發(fā)作信號的抗體非特異的時機。您當然也期望抗體只與意圖蛋白吧。假如您的布景過高,置疑關閉不充分,那么您能夠測驗運用更高濃度的關閉液,或恰當延伸關閉時刻。
假如您一向被布景問題所困惑,那么或許您該花些時刻來優(yōu)化關閉液。這也許需求時刻,但也是值得的?,F(xiàn)在主要有兩品種型的關閉液:蛋白和非離子型去污劑。您運用的類型須取決于多個要素,包含微孔板的外表試劑、ELISA試劑盒吸附的抗原、您的抗體和檢查試劑。好的關閉液應下降非特異性,但它不應當與抗原、抗體或檢查試劑發(fā)作相互作用。
3.抗體濃度: ELISA試驗咱們通常會follow師兄師姐留下來的操作過程,ELISA試劑盒但是假如試劑稍有不一樣,則也許需求優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體會添加布景。為了防止這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
4.ELISA試劑盒檢查試劑:切勿運用過多的檢查試劑。假如濃度過高,或者未準確稀釋,則會致使高布景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應參加停止液。

 

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