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認識還比較膚淺，本文對液相色譜儀法測定酸性橙Ⅱ和酸性金黃進行了初步探討。此方法還有待進一步完善。

豆制品中酸性金黃Ⅱ經(jīng)粉碎，［摘要］本文探討液相色譜法測定豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黃含量的方法。提取，過濾，得到樣品提取液用液相色譜測定，流動相是甲醇乙酸銨0.02mol/L=75+25檢測波長450nm時，流速1.0ml/min測定，色譜柱為SymmetryC18250mm4.6mmid5μm

［關(guān)鍵詞］豆制品；酸性金黃Ⅱ；液相色譜

木制家具、毛線、布料等的著色劑，豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黃是醫(yī)學(xué)中應(yīng)用于組織染色。但不法商販利用其顏色鮮艷、著色穩(wěn)定、價廉的特點非法添加于豆制品中，嚴重危害了廣大消費者的身體健康，國家尚無相應(yīng)的檢驗規(guī)范方法，本文初步建立了用液相色譜法測定酸性橙Ⅱ和酸性金黃的方法，該方法能快速、準(zhǔn)確、簡便的檢出酸性橙Ⅱ和酸性金黃，能滿足食品檢驗的需要。

1試驗局部

1.1儀器和試劑

1.1.1儀器

2487型紫外檢測器，液相色譜儀包括Waters1525型泵。Breez色譜工作站及手動進樣器。

1.1.2規(guī)范品

酸性橙Ⅱ（純度86%和酸性金黃（工業(yè)用純度90%

1.1.3甲醇

色譜純。

1.1.4超純水

由AKUPⅡI20型超純水機提供的高純水。

pH=4.7 1.1.50.02mol/L乙酸銨溶液。

1.1.6堿性提取液

無水乙醇∶氨水∶水=70∶20∶10

1.2色譜條件

檢測波長450nm進樣量20μl 液相色譜柱為SymmetryC18250mm4.6mmid5μm流動相甲醇：0.02mol/L乙酸銨溶液=75+25溶液流速1.0ml/min柱溫為常溫。

1.3規(guī)范品的制備

配成系列濃度為00.01μg/ml0.05μg/ml0.10μg/ml0.50μg/ml1.00μg/ml規(guī)范系列。吸取混合規(guī)范貯藏液1.00mg/ml適量。

1.4樣品前處理

加pH=6水50ml混勻，稱取混勻粉碎的樣品5.00g~10.00g于100ml燒杯。過濾，濾液加入1.00g聚酰胺粉用，G3漏斗抽濾，pH=6水沖洗2次~3次，堿性提取液解吸2次~3次，每次5ml收集解吸液，水浴揮干，將殘渣用蒸餾水溶解，定容至5ml然后過0.45μm濾膜。規(guī)范和樣品濾液注入HPLC系統(tǒng)，按上述色譜條件測定。以保管時間定性，峰面積定量。

2結(jié)果

2.1波長選定

進行紫外掃描，用流動相稀釋規(guī)范溶液。由掃描圖譜可知，酸性Ⅱ和酸性金黃在450nm有較大吸收，所以我選取450nm為檢測波長。

2.2工作曲線與檢測限

其結(jié)果表明，以工作液含量X對色譜峰面積Y進行線形回歸。酸性橙Ⅱ和酸性金黃在0.11μg/ml~1.00μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系（Linearrang良好?；貧w方程（Regressionequ線性范圍，相關(guān)系數(shù)（Correlationcoeffici及檢測限（DetectionlimitS/N=3見表1表1規(guī)范曲線及檢出限項目。

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