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應(yīng)用技術(shù)研究中心

正相分離是分離純化合成有機(jī)小分子樣品zui為常用的分離方法，在正相分離模式中，采用極性較強(qiáng)的固定相與極性較弱的流動(dòng)相作為組合，利用樣品分子在這兩相中分配比的差異對(duì)樣品和雜質(zhì)進(jìn)行分離。薄層液相色譜（Thin layer chromatography，以下簡(jiǎn)稱TLC）是廣大有機(jī)合成人員在進(jìn)行正相分離實(shí)驗(yàn)時(shí)普遍采用的分離條件探索方法，根據(jù)樣品在TLC板上的遷移率計(jì)算出相應(yīng)的比移值Rf，然后依據(jù)樣品中各組分Rf值的差異以及上樣量，研究人員憑借經(jīng)驗(yàn)確定所需要的Flash柱的類型，并在后續(xù)分離實(shí)驗(yàn)中不斷優(yōu)化洗脫梯度參數(shù)，zui終完成對(duì)樣品的分離制備。

上述實(shí)驗(yàn)流程是一個(gè)典型的經(jīng)驗(yàn)依賴性很強(qiáng)的工作，需要研究人員具備豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，對(duì)于大多數(shù)剛剛接觸有機(jī)合成和Flash制備色譜的實(shí)驗(yàn)菜鳥來說，這里面的“套路”顯得頗為高深。那么，有沒有一種簡(jiǎn)單易學(xué)、便于快速上手的實(shí)驗(yàn)裝置呢？答案是肯定的。今天就為大家介紹來自常州三泰科技的智能快速液相制備色譜系統(tǒng)——SepaBeanTM machine，在版本的SepaBean控制軟件中，整合了分離方法自動(dòng)推薦的功能，可以根據(jù)樣品量以及樣品的TLC信息自動(dòng)推薦適合的分離柱，并自動(dòng)生成經(jīng)過優(yōu)化的洗脫梯度條件，從而大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)流程，提高了廣大研究人員的工作效率。下面僅以一例簡(jiǎn)單介紹上述功能的實(shí)現(xiàn)方法。

首先配制標(biāo)準(zhǔn)樣品：稱取苯甲酸甲酯5.0 g，鄰苯二甲酸二甲酯10.0 g，鄰苯二甲酸二乙酯10.0 g，將上述三種樣品混合后溶于20 mL乙酸乙酯，待樣品充分溶解后加入正己烷，稀釋至100 mL。

然后在TLC板上進(jìn)行樣品點(diǎn)板，展開劑為石油醚/乙酸乙酯（PE : EA = 10 : 1），得到如圖一所示的點(diǎn)板結(jié)果，并計(jì)算出各樣品組分的Rf值。

圖1. 混合物樣品的TLC點(diǎn)板結(jié)果

接下來在SepaBean控制軟件中輸入樣品的TLC信息，選擇所用的展開劑及比例，并輸入樣品各組分的Rf值，如圖2所示。

圖2. 在SepaBean控制軟件中輸入樣品的TLC信息

圖3. SepaBean控制軟件中的分離方法設(shè)置頁面

待樣品的TLC信息輸入完成后，進(jìn)入下一步的分離設(shè)置，如圖3所示?？梢钥吹较疵撎荻纫呀?jīng)由軟件自動(dòng)生成。輸入樣品的上樣量后，在分離柱選擇菜單中將出現(xiàn)推薦的分離柱，用戶根據(jù)樣品的性質(zhì)可以自行決定是否從中選擇。對(duì)于分離難度不高的樣品，軟件推薦的分離柱即可滿足要求。接下來設(shè)置好流速、檢測(cè)波長(zhǎng)、收集方式、收集試管架類型及收集體積等參數(shù)后，即可開始分離實(shí)驗(yàn)。表1所示為本次制備純化實(shí)驗(yàn)的參數(shù)設(shè)置。

表1. 制備純化實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置

圖4. 混合物樣品的Flash制備分離圖譜

圖4所示即為本次Flash制備純化實(shí)驗(yàn)的分離圖譜，從中可以看出樣品中三個(gè)組分均得到了基線分離，表明儀器控制軟件自動(dòng)生成的洗脫梯度參數(shù)比較合適，用戶僅需一次進(jìn)樣分離實(shí)驗(yàn)即可獲得滿意的結(jié)果，無需再進(jìn)行繁瑣的分離條件優(yōu)化工作，從而大大提高了工作效率，并且節(jié)省了大量寶貴的時(shí)間，降低了溶劑消耗。

常州三泰科技有限公司推出的SepaBeanTMmachine是一臺(tái)智能化快速液相制備色譜系統(tǒng)，具有操作便捷、易于使用、內(nèi)置化學(xué)知識(shí)數(shù)據(jù)庫、自我學(xué)習(xí)及安全的信息共享等特點(diǎn)，相關(guān)特性已申請(qǐng)了一系列發(fā)明或?qū)嵱眯滦?。為了讓儀器更加智能化且便于使用，我們還將開發(fā)一系列新功能，敬請(qǐng)期待！