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從實(shí)驗(yàn)操作者的經(jīng)驗(yàn)來看,客戶們的問題也會(huì)不同。剛開始接觸實(shí)驗(yàn)的老師在使用試劑的方面不知該如何選擇,做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候準(zhǔn)備一份*手冊(cè)吧!下面來看上海滬鼎生物今天帶您的資訊內(nèi)容,elisa*手冊(cè)之血清的稀釋。
在進(jìn)入重點(diǎn)內(nèi)容之前,上海滬鼎先問大家一個(gè)問題,您知道為什么elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)血清要稀釋嗎?其中有何原因?
針對(duì)這一問題,有著兩個(gè)主要原因:
1. 血清中含有的性腺激素比較低,應(yīng)該濃縮才對(duì);
2. 競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯,應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物。
ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋血清步驟具體分析:
1. 先把蛋白稀釋一定的倍數(shù);
2. 將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板;
2. 用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌;
2. 加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng);
2. 經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為適包被濃度;
2. 一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
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