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對(duì)于養(yǎng)殖業(yè)來(lái)說(shuō),豬疫病流行廣、難凈化的特性,往往帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失,如何縮短病毒檢測(cè)時(shí)間、便于現(xiàn)場(chǎng)快速排查,是養(yǎng)殖機(jī)構(gòu)的關(guān)注重點(diǎn)。
但是傳統(tǒng)qPCR技術(shù)需要較長(zhǎng)的檢測(cè)時(shí)間、熟練的操作人員以及嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)環(huán)境,LAMP技術(shù)又容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
安普未來(lái)MIRA技術(shù)在恒溫環(huán)境下20min內(nèi)完成擴(kuò)增,同時(shí)保證特異性、準(zhǔn)確性,很好地解決實(shí)踐痛點(diǎn),獲得了不少科研工作者和企業(yè)的關(guān)注。
實(shí)驗(yàn)中成功開(kāi)發(fā)MIRA恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(使用安普未來(lái)試劑盒WLRB8201KIT、WLRB8204KIT)和CRISPR Cas12a相結(jié)合一步法檢測(cè)PRRSV,可在25 min內(nèi)高效、準(zhǔn)確實(shí)現(xiàn)肉眼檢測(cè),檢測(cè)限達(dá)到1拷貝/μL。如下圖,實(shí)驗(yàn)將RNA樣品稀釋至100 ng/μL,進(jìn)行了熒光法和試紙條的檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)肉眼觀察,顯示了高精度、靈敏度、特異性的特點(diǎn)。
(分析實(shí)驗(yàn):樣本1?8均為陽(yáng)性,樣本9?11均為陰性)
(特異性分析實(shí)驗(yàn):樣本9為CSFV
1-8為分別為其他病毒和CSFV陰性對(duì)照)
基于以上成功案例,課題組繼續(xù)采用MIRA技術(shù)(安普未來(lái)試劑盒WLRE8205KIT)進(jìn)行假狂犬病病毒(PRV)檢測(cè)的研究,再次驗(yàn)證了MIRA技術(shù)恒溫20min完成擴(kuò)增、簡(jiǎn)單便捷、靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn),優(yōu)于qPCR技術(shù)的實(shí)踐應(yīng)用。課題組并在《Transboundary and Emerging Diseases》期刊發(fā)布題為“Detection of pseudorabies virus with a real-time recombinase-aided amplification assay”的文章。
目前,安普未來(lái)MIRA技術(shù)及試劑盒產(chǎn)品在動(dòng)物疫病方向有不錯(cuò)的實(shí)踐成果,獲得不少科研老師和企業(yè)認(rèn)可。
安普未來(lái)將繼續(xù)研發(fā)更豐富產(chǎn)品,為保障人體健康、防控動(dòng)植物疫病、食品安全等貢獻(xiàn)力量。
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