使用MIRA技術結合CRISPR-Cas12a對13種高危人乳頭瘤病毒(HR-HPV)檢測開發(fā)了簡單快速診斷方法-比色讀數與橫向流動TESTOR,在《Bioactive Materials》期刊做了“An enhanced method for nucleic acid detection with CRISPR-Cas12a using phosphorothioate modified primers and optimized gold-nanopaticle strip”文章發(fā)表,影響因子16.874。 用磷酸修飾引物,設計crRNA,當37℃反應條件中,MIRA與Cas12a組分在同一反應體系內,首先啟動MIRA擴增,擴增后的靶序列隨后被Cas12a-crRNA進行識別。crRNA與靶點結合激活Cas12a的內切酶活性,并開始切割附近的報告探針,釋放熒光信號。 通過這些創(chuàng)新,將擴增和檢測集成到一個單一的反應系統(tǒng)中,封閉環(huán)境中完成檢測,避免了脫蓋容易導致的假陽性和氣溶膠風險,同時可對此開發(fā)便攜式檢測盒。 (TESTOR工作流程示意圖) (檢測13種HR-HPVs) 并且實驗中使用了HPV16和HPV18的臨床樣本驗證了該方法的檢測性能,TESTOR檢測與qPCR檢測的陽性和陰性一致性均為99%。 (臨床樣本檢測) TESTOR檢測能夠在不同的環(huán)境中進行測試,如機場、診所、當地社區(qū)和其他地點。 (上述信息均來源于文章: /science/article/pii/S2452199X21002255)點擊底部閱讀原文,即可查閱原文 (實時熒光定量檢測HPV) /articles/s41598-021-92329-2)點擊底部閱讀原文,即可查閱原文
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