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IHC是指免疫組織化學(xué),是許多實(shí)驗(yàn)室里都會(huì)運(yùn)用到的主要免疫測(cè)定方法,用來(lái)證明重要蛋白質(zhì)是否存在,檢測(cè)翻譯后修飾,診斷疾病等等。IHC利用免疫學(xué)和生化技術(shù)并通過(guò)與目標(biāo)抗原相互作用的標(biāo)記抗體來(lái)檢查不同的組織切片。抗體抗原相互作用的可視化可以使用可見(jiàn)標(biāo)記或者染色劑體現(xiàn)出來(lái)。IHC具有可視化細(xì)胞的獨(dú)te細(xì)胞成分的作用,廣泛被病理學(xué)家和診斷人員使用。我們?cè)谶M(jìn)行IHC實(shí)驗(yàn)前一般都要制備樣品,那么怎樣制備IHC樣品呢?
樣品制備如下:
1.在室溫環(huán)境下用2%多聚甲醛將新鮮解剖的組織(<3mm厚) 1小時(shí)或過(guò)夜固定。
2.沖洗組織:使用流動(dòng)的自來(lái)水沖洗5min。
3.用70%,80%,95%的酒精分別使組織脫水,時(shí)間每次為5分鐘,然后用100%的酒精進(jìn)行3次脫水,每次時(shí)間為5分鐘。
4.用二甲苯清洗組織2次,每次時(shí)間為5分鐘。
5.將組織浸泡在石蠟中3次,每次時(shí)間為5分鐘。
6.將組織包埋在石蠟塊中(可以在室溫下保存多年)。
7.在切片機(jī)上將石蠟包埋的組織塊切成5-8μm的厚度并漂浮在含有蒸餾水的40°C水浴中。
8.將切片轉(zhuǎn)移到適合免疫組織化學(xué)的載玻片上。
9.切片后在65℃的溫度下烘干6小時(shí)。
以上就是關(guān)于怎樣制備IHC樣品的全部?jī)?nèi)容,想要了解更多請(qǐng)聯(lián)系百奧創(chuàng)新客服為您解答~
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