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細(xì)胞培養(yǎng)是人工模擬與創(chuàng)造細(xì)胞在體內(nèi)的生存環(huán)境,由此可見(jiàn)培養(yǎng)基成為了細(xì)胞在體外正常生長(zhǎng)與增值的重要角色,在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中我們會(huì)遇到各種各樣的問(wèn)題,一起來(lái)看一下基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些吧?
問(wèn)題一:液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣?
答:酚紅加量不同,導(dǎo)致顏色差異:DMEM >MEM > DMEM/F12 > RPMI1640>F12 & F10。
問(wèn)題二:培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深?
答:空氣中CO2濃度低,培養(yǎng)基內(nèi)CO2會(huì)逐漸溢出,HCO3-減少,造成培養(yǎng)基偏堿。
問(wèn)題三:含有谷氨酰an培養(yǎng)基地保存條件?
答:谷氨酰an對(duì)溫度敏感,溫度越高降解速度越快。谷氨酰an在溶液中不穩(wěn)定,單獨(dú)保存應(yīng)置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰an的液體培養(yǎng)基應(yīng)存放在2°C–8°C,或者購(gòu)買不含谷氨酰an的培養(yǎng)基使用時(shí)添加。
問(wèn)題四:液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎?
答:不可以。在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有些鹽無(wú)法重新溶解,從而導(dǎo)致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長(zhǎng)期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化氫,具有細(xì)胞毒性。
問(wèn)題五:購(gòu)買的液體培養(yǎng)基可以保存多久?
答:理論上只要保存得當(dāng),保質(zhì)期范圍之內(nèi)都可以用。但實(shí)際開瓶后保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變,因此建議開瓶后盡快用完。
問(wèn)題六:更換培養(yǎng)基后細(xì)胞長(zhǎng)不好?
(1)各廠家培養(yǎng)基配方不相同,可能細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)當(dāng)前的培養(yǎng)體系;
(2)原代細(xì)胞更容易適應(yīng)新的培養(yǎng)基,而傳代細(xì)胞系更換比較難;
(3)剛復(fù)蘇的細(xì)胞不要用來(lái)適應(yīng)新培養(yǎng)基,細(xì)胞活率低,待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來(lái)馴化;
(4)敏感性細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)基,需要多馴化幾代,期間細(xì)胞死亡數(shù)量減少,生長(zhǎng)緩慢是正?,F(xiàn)象。
問(wèn)題七:DPBS和PBS有什么區(qū)別,能通用嗎?
答:都屬于磷酸鹽緩沖液,成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異,均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能,大多數(shù)對(duì)于細(xì)胞的使用上可以通用。
問(wèn)題八:HBSS 和PBS/DPBS有什么區(qū)別?
答:HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復(fù)雜,且含有葡萄糖,可為細(xì)胞提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng),而PBS/DPBS不能提供營(yíng)養(yǎng)。
以上就是基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基的常見(jiàn)問(wèn)題解答,如果你想了解更多請(qǐng)咨詢百奧創(chuàng)新客服哦。
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