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質(zhì)粒是在細(xì)菌和其他細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種小型、環(huán)狀DNA 分子。通常只攜帶少量基因,特別是一些與抗生素耐藥性有關(guān)的基因;另外質(zhì)??梢栽诓煌募?xì)菌細(xì)胞之間傳遞因?yàn)橘|(zhì)粒分子本身具有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu),可攜帶一些遺傳信息,并且其自我復(fù)制能力和攜帶遺傳信息能力非常強(qiáng)大,經(jīng)過(guò)基因表達(dá)后可使其宿主細(xì)胞表現(xiàn)相應(yīng)的性狀,所以質(zhì)粒常被用作基因載體,在分子生物學(xué)、生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)等學(xué)科中得到廣泛的應(yīng)用。那么質(zhì)粒有哪些分類和用途?一起來(lái)學(xué)習(xí)下吧!
Cloning Plasmids 克隆質(zhì)粒:用于促進(jìn) DNA 片段的克隆??寺≥d體往往非常簡(jiǎn)單,通常只包含細(xì)菌抗性基因、復(fù)制起點(diǎn)和 MCS。
Expression Plasmids 表達(dá)質(zhì)粒:用于基因表達(dá)(基因功能的研究)。表達(dá)載體必須包含啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止子序列和插入基因。啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)插入DNA 轉(zhuǎn)錄生成RNA,合成的RNA上的終止子序列發(fā)出停止轉(zhuǎn)錄過(guò)程的信號(hào)。表達(dá)載體可以通過(guò)增強(qiáng)子序列增加蛋白質(zhì)或RNA的產(chǎn)量。表達(dá)載體可以在各種細(xì)胞類型(哺乳動(dòng)物、酵母、細(xì)菌等)中驅(qū)動(dòng)表達(dá),這在很大程度上取決于用于啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子。
Gene Knock-Down Plasmids 基因敲減質(zhì)粒:用于減少內(nèi)源基因的表達(dá)。通過(guò)表達(dá)靶向目的基因 mRNA的shRNA來(lái)實(shí)現(xiàn)。這些質(zhì)粒具有可以驅(qū)動(dòng)短 RNA 表達(dá)的啟動(dòng)子。
Genome Engineering Plasmids 基因工程質(zhì)粒:用于靶向和編輯基因組。通常使用 CRISPR 技術(shù)完成。
Reporter Plasmids 報(bào)告質(zhì)粒:用于研究遺傳元件的功能。這些質(zhì)粒包含一個(gè)報(bào)告基因(例如,熒光素酶或GFP),可提供遺傳元件活性的讀數(shù)。
Viral Plasmids 病毒質(zhì)粒:通過(guò)修飾的病毒基因組,有效地將遺傳物質(zhì)遞送到靶細(xì)胞中??梢允褂眠@些質(zhì)粒來(lái)制造病毒顆粒,例如慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、AAV 或腺病毒顆粒,從而高效感染靶細(xì)胞。
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