PCR產(chǎn)物純化效率提升要點(diǎn)匯總

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來源：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 2024年05月27日 13:39

PCR擴(kuò)增完成后需要進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測，在條帶單一無其他雜帶的情況下，可以直接對產(chǎn)物進(jìn)行純化。提升PCR產(chǎn)物純化效率要點(diǎn)匯總?cè)缦拢?/span>

1.模板純度，有較多蛋白或其他雜質(zhì)時(shí)，會(huì)一定程度影響pcr效率；

2.模板量，過高的模板量反而會(huì)降低pcr效率特異性；

3.引物，引物的長度xu要再效率和特異性間獲得優(yōu)化，其次要控制引物gc含量；

4.聚合酶，要考慮酶的保真率和速度；

5.mg離子濃度，mg離子濃度過高會(huì)降低特異性，濃度過低會(huì)降低效率；

6.退火溫度：退火溫度低，效率會(huì)高，但特異性降低；退火溫度高，效率降低，但特異性會(huì)提高，需優(yōu)化。

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