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• 了解自動化、高質(zhì)量抗體以及經(jīng)驗證的工作流程如何在不同樣品中提供一致的結(jié)果

• 查看一組共12張樣品與可重復(fù)性相關(guān)的量化數(shù)據(jù)

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可重復(fù)性是科學(xué)研究領(lǐng)域揮之不去的危機，空間生物學(xué)研究也不例外。多個因素會影響實驗結(jié)果的可重復(fù)性。抗體驗證是癌癥研究中的重要步驟，以確保所用抗體具有特異性和可靠性。這些抗體必須能在不同批次和時間的樣品實現(xiàn)穩(wěn)定的染色。近年來，癌癥研究越來越多地采用自動化系統(tǒng)，以提高實驗的可重復(fù)性和效率。

此案例研究中，我們測試了Cell DIVE多重成像解決方案的可重復(fù)性。Cell DIVE裝備了來自Advanced Solutions Life Sciences（ASLS）的BAB 200自動化系統(tǒng)。我們使用來自Cell Signaling Technology（CST）的驗證抗體。Cell DIVE可以在整個組織切片上探測到數(shù)十種生物標(biāo)志物并進(jìn)行成像。這通過迭代染色和染料滅活工作流程完成。本質(zhì)上，Cell DIVE致力于提供實驗方法的可重復(fù)性，從組織制備、抗原修復(fù)到樣品成像和載玻片儲存。Cell DIVE可以使用直接偶聯(lián)的一抗，而這是變異性的另一個來源。

令人欣慰的是，來自CST的偶聯(lián)抗體經(jīng)過嚴(yán)格驗證，可以減少變異性。此外，重組抗體的使用、一致的偶聯(lián)物亮度和抗體標(biāo)記度可以降低不同批次之間的變異性，確保了空間生物學(xué)研究所需的可靠偶聯(lián)抗體。高分辨率的成像結(jié)果源于一致的輪間成像、穩(wěn)定的校準(zhǔn)以及使用ASLS的BAB 200液體處理解決方案減少人為錯誤。我們還使用以不同批次CST抗體組合探測的相鄰組織切片。然后，使用配備BAB 200液體處理器的Cell DIV成像儀，按照時間分批成像。經(jīng)過可靠性分析，我們報告了不同參數(shù)下的可重復(fù)性結(jié)果。空間生物學(xué)的研究方法和實驗結(jié)果的可重復(fù)性對于獲取可靠的洞察信息至關(guān)重要，有助于讓人們對旨在改善患者預(yù)后的未來研究的質(zhì)量充滿信心。

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