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　　飼料中的含氮物總稱(chēng)為粗蛋白質(zhì)，它包括純蛋白質(zhì)和氨化物，飼料中的蛋白質(zhì)進(jìn)入家禽體內(nèi)后，以氨基酸形式被吸收利用，用以保證畜禽體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的需要。根據(jù)畜禽不同的生理狀態(tài)和生產(chǎn)能力搭配日糧中合理的蛋白質(zhì)水平，對(duì)于保證畜禽健康生長(zhǎng)。提高畜禽生產(chǎn)能力是十分必要的。已頒布的飼料工業(yè)國(guó)標(biāo)中對(duì)于不同畜禽在不同生長(zhǎng)期日糧中蛋白質(zhì)的含量都作了明確規(guī)定。為了保證飼料產(chǎn)品中粗蛋白質(zhì)的含量符合國(guó)標(biāo)要求，快速、準(zhǔn)確地測(cè)定飼料產(chǎn)品特別是飼料主要原料中蛋白質(zhì)的含量是十分必要的。由浙江托普儀器有限公司生產(chǎn)的ZDDN-II型自動(dòng)定氮儀可在20分鐘內(nèi)（從稱(chēng)樣到得出測(cè)定結(jié)果）完成飼料樣品中蛋白質(zhì)的快速測(cè)定。

　　1 方法及原理

　　1.1方法

　　強(qiáng)堿直接蒸餾法是一從凱氏定氮法基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，和凱氏定氮法有較好相關(guān)性的快速檢測(cè)方法。

　　1.2原理

　　飼料樣品中部分不穩(wěn)態(tài)氮在強(qiáng)堿作用下，經(jīng)蒸餾可以以氨的形式釋放出來(lái)，當(dāng)加堿量和蒸餾速度恒定時(shí)，釋放的氨量和樣品中氮的含量成比例。將所釋放的氨冷卻后由硼酸接收變?yōu)樗呐鹚岚?，用?biāo)準(zhǔn)酸滴定，以所消耗的標(biāo)準(zhǔn)酸體積用凱氏定氮公式計(jì)算出樣品中不穩(wěn)態(tài)氮的含量，用特定的回歸方程確定出飼料粗蛋白的含量。

　　1.3優(yōu)點(diǎn)

　　DD法由于所測(cè)的是不穩(wěn)態(tài)氮，因而可以大大地縮短了定氮時(shí)間。在ZDDN-II型定氮儀上僅用20分鐘就可以測(cè)定出樣品中粗蛋白的含量，比常規(guī)凱氏定氮法快12倍，比在器上進(jìn)行愷氏定氮快4一6倍。

　　該方法所用儀器設(shè)備、試劑和凱氏定氮基本相同，用戶(hù)只要根據(jù)我們提供的測(cè)定條件，就可在該儀器上實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的快速測(cè)定。

　　1.4缺點(diǎn)

　　該快速方法測(cè)定的樣品中不穩(wěn)態(tài)氮而不是全氮，它的測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性*取決于測(cè)定條件及所用儀器精度。在本文中所述的快速方法及條件僅適用于ZDDN-II型定氮儀。

　　2 儀器和試劑

　　2.1儀器

　　ZDDN-II型蛋白質(zhì)測(cè)定儀 分析天平：感量0.00019酸滴定管：2.5ml量筒：iooml、25ml燒杯2.2化學(xué)試劑40%氫氧化鈉溶液10%氯化鋇溶液2%硼酸溶液混合指示劑，標(biāo)準(zhǔn)酸溶液2.3樣品豬配合飼料（仔豬、育肥豬）：北京農(nóng)業(yè)大學(xué)提供雞配合飼料（生長(zhǎng)雞、產(chǎn)蛋雞、肉雞）：國(guó)家飼料質(zhì)檢中心提供豆粕：中國(guó)農(nóng)科院飼料研究所提供中國(guó)農(nóng)科院畜牧研究所提供玉米：中國(guó)逐科院畜牧研究所提供菜籽餅：中國(guó)逐科院畜牧研究所提供魚(yú)粉：國(guó)家水產(chǎn)質(zhì)檢中心提供。

　　3 測(cè)定結(jié)果度

　　ZDDN-II型定氮儀在進(jìn)行凱氏法測(cè)定蛋白質(zhì)時(shí)，有較高的精度；回收率>“寫(xiě)、相對(duì)偏差<1%.因此儀器在進(jìn)行DD法快速測(cè)定時(shí)，同樣可以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。我們?cè)囼?yàn)用凱氏定氮法和快速測(cè)定法，對(duì)16種同樣玉米樣品，16種同樣魚(yú)粉樣品，16種同樣豬料樣品，16種同樣雞料樣品，16種同樣菜籽餅樣品，16種同樣豆粕樣品測(cè)定含氮量，相對(duì)偏差均在國(guó)標(biāo)法規(guī)定的允許誤差范圍之內(nèi)。

　　我們還任選每類(lèi)樣品中一個(gè)，復(fù)測(cè)定五次，所測(cè)結(jié)果變異系數(shù)均低于1%,實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明由ZDDN-II型定氮儀進(jìn)行飼料中粗蛋白的快速測(cè)定具有較好的精密度（見(jiàn)附表）。

　　4 影響測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度和精密度的主要因素

　　快速法是在凱氏法基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。它的操作步驟、所用試劑、儀器設(shè)備和凱氏法基本相同，由于該方法測(cè)定的是樣品中部分不穩(wěn)態(tài)氮，樣品中真實(shí)的含氮量是由在規(guī)定條件下所建立的該法和凱氏法的回歸方程y一吸+bx確定，方程中y為樣品的實(shí)際含氮量，x為快速法所測(cè)的含氮量。方程中的a.b值是在規(guī)定條件下用凱氏法及快速法對(duì)大量樣品進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)數(shù)理統(tǒng)計(jì)而確定的，它的值取決于y和x值。x值受下列因素影響。

　　4.1樣品類(lèi)別不同類(lèi)別的樣品所含的成份差異較大。實(shí)驗(yàn)證明，即使在*相同的工作條件下，不同類(lèi)別的樣品具有不同的回歸方程y=a+bx.

　　4.2定氮裝置的蒸汽量（即單位時(shí)l可內(nèi)的蒸餾速度）定氮裝置的蒸汽量決定了單位時(shí)間的蒸餾速度，蒸餾速度不同，單位時(shí)間內(nèi)樣品所釋放的氨量也不同，x值也不同，致使a.b值也不相同，由于手工裝置不能保證恒定的蒸餾速度，即使用同一廠(chǎng)家生產(chǎn)的同一型號(hào)玻璃器皿，組裝的手工定氮裝置，由于蒸汽發(fā)生器中的水量不能保持恒定，因此蒸汽量也不能恒定，單位時(shí)間內(nèi)蒸餾量也不能恒定。在某一個(gè)手工定氮裝置上所確立的回歸方程，也就無(wú)法應(yīng)用于同類(lèi)的手工定氮裝置。早在五十年代，國(guó)外就報(bào)導(dǎo)了用快速法測(cè)定奶制品中的含氮量，但由于手工定氮裝置本身的局限性，致使該法一直未得到推廣。直至八十年代，瑞典Tecator公司生產(chǎn)了性能較好的1030型定氮儀，才在該儀器上建立了小麥的快速測(cè)定程序，才使該法在該公司生產(chǎn)的1030型儀器上得到推廣應(yīng)用。

　　4.3蒸餾量快速法的測(cè)定結(jié)果和餾出液體積有關(guān)，樣品所釋放的氨量隨餾出液體積增加而增大。實(shí)驗(yàn)證明，當(dāng)其它測(cè)定條件一定時(shí)，餾出液體積變化大于5一loml,測(cè)定結(jié)果將變化1.2%一3%.手工定氮裝置及部分半自動(dòng)定氮裝置，其餾出液的體積是靠操作人員掌握，接收瓶本身的刻度誤差，操作人員的目視誤差均可大于sml,因此用這些裝置在應(yīng)用快速測(cè)定方法時(shí)難以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。

　　4.4加堿量及堿液濃度參加反應(yīng)的氫氧化鈉濃度影響到所釋放的氨量。增多加堿量，將影響測(cè)定速度，同時(shí)也造成試劑的浪費(fèi)；加堿量太少，影響測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度。根據(jù)定氮裝置的工作條件，確定出合理的加堿量是十分重要的。隆達(dá)科技公司生產(chǎn)的ZDDN-II型定氮儀選擇的堿量為：40%的氫氧化鈉溶液6Oml.在這個(gè)加堿濃度下加堿量誤差不大于士sml,不影響測(cè)定結(jié)果。

　　4.5樣品的稱(chēng)樣量樣品量不同，所含的不穩(wěn)態(tài)氮也不同，因此稱(chēng)樣量應(yīng)是一個(gè)固定值。

　　對(duì)于ZDDN-II型定氮儀：雞、豬配合飼料的稱(chēng)樣量為3. OOOg-3. 040g之間；魚(yú)粉、豆粕、菜籽餅的稱(chēng)樣量為2. 00鮑-2. 02鮑之間；玉米的稱(chēng)樣量為5. OOOg-5. 080g之間，綜上所述，要保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，在稱(chēng)樣量、加堿量一定的前提下，要保證建立方程所用的定氮裝置和實(shí)沒(méi)樣品所用的定氮裝置有著相同的且恒定的蒸餾速度和餾出液體積。

　　5  ZDDN-II型定氮儀的特點(diǎn)保證了快速法測(cè)定的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性

　　由托普儀器公司生產(chǎn)的ZDDN-II型定氮儀，由于在儀器設(shè)計(jì)和組裝調(diào)試上采用了特定方法，因此具有下列較突出優(yōu)點(diǎn)：、s. i蒸餾速度恒定由于該義器有一套*的自動(dòng)蒸餾裝置，它的蒸汽發(fā)生器中的水量始終保持恒定，當(dāng)外加電源電壓變化為士io%時(shí)，每分鐘蒸餾量的變化不大于o. sml,所有由隆達(dá)科技公司生產(chǎn)的該類(lèi)儀器，在出廠(chǎng)前，蒸餾量均調(diào)試在一固定值，因此應(yīng)用由隆達(dá)科技公司所提供的快速測(cè)定程序及回歸方程可在該公司生產(chǎn)的所有BS- I型定氮儀上應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)證明，具有較好的準(zhǔn)確性。

　　5. 2可保證在6分鐘內(nèi)餾出液體積誤差<5m1由于BS - B型定氮儀具有恒定蒸餾速度，在該儀器上又設(shè)置了定時(shí)精度為0. 1秒的數(shù)顯時(shí)間繼電器，當(dāng)蒸餾時(shí)間確定后，餾出液的體積一單位時(shí)間的蒸餾量x蒸餾時(shí)間。因此，儀器本身就保證了餾出液體積的恒定，避免了操作人員的目視誤差及接收瓶的該度誤差所引起的餾出液體積誤差，保證了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。

　　綜上所述，ZDDN-II型定氮儀在凱氏法定氮時(shí)具有較高的度，在用快速法定氮時(shí)同樣具有較好的度，應(yīng)用該儀器快速測(cè)定飼料中粗蛋白的含量，不僅簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確而且和同類(lèi)儀器相比還具有節(jié)電，對(duì)環(huán)境污染少等優(yōu)點(diǎn)，它可對(duì)飼料原料及產(chǎn)品進(jìn)行及時(shí)測(cè)定，使飼料產(chǎn)品質(zhì)量得到及時(shí)控制。