薄層色譜掃描儀的應用范圍非常廣泛，薄層色譜（TLC）是色譜技術(shù)的一種：將固定相涂布于玻璃板上或鋁板上，成一均勻薄層，樣品中各組分隨流動相在薄層中定向移動，不同組分和固定性/流動相的作用力不同而實現(xiàn)了分離。

 

    薄層色譜(TLC)是一種非常有用的跟蹤反應的手段，還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠，它們是極性很大(標準)或者是非極性的(反相)。流動相則是一種極性待選的溶劑。

 

    在5.301中以及大多數(shù)實驗室實驗中，都將使用標準硅膠板。將溶液中的反應混合物點在薄板上，然后利用毛細作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動進行展開。根據(jù)混合物中組分的極性，不同化合物將會在薄板上移動不同的距離。

 

    極性強的化合物會“粘”在極性的硅膠上，在薄板上移動的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會在流動的溶劑相中保留較長的時間從而在板上移動較大的距離。化合物移動的距離大小用Rf值來表達。這是一個位于0～1之間的數(shù)值，它的定義為：化合物距離基線(點樣時已經(jīng)確定)的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。

 

    一、薄層色譜技術(shù)的特點

 

    薄層色譜技術(shù)具有其他色譜技術(shù)共同的特征，即利用樣品中各組成成分的不同物理特性把它們分離開來。這些物理特性包括分子大小、形狀、所帶電荷、揮發(fā)性、溶解性及吸附性等。

 

    1.薄層色譜系統(tǒng)的組成部分

 

    固定相：可以是一種固體、凝膠或固定化的液體，或起支撐作用的基質(zhì)。

 

    色譜板：把固定相薄薄涂布在玻璃或塑料板上。

 

    流動相：又稱展開劑，起溶劑作用的液體，用于協(xié)助樣品在固定相表面以不同速度進行遷移。

 

    運送系統(tǒng)：用來促使流動相通過色譜床。薄層色譜的運送過程是借助毛細管作用、壓力或者離心力等設備。

 

    檢測系統(tǒng)：用于檢測所分離的物質(zhì)。

 

    2.薄層色譜技術(shù)的特點

 

    ①色譜系統(tǒng)所用器材簡單，價格低廉，操作技術(shù)易學，容易在一般實驗室推廣。

 

    ②不受樣品種類的限制，適用范圍較廣。不僅可用于復雜成分的分離，還可用于未知成分的分離和檢測。并且檢測可用的手段選擇性多，較為方便。

 

    ③具有多路柱效應，可同時進行多個樣品的分離，且靈敏度高、檢測速度快。

 

    ④樣品前處理比較簡單，精度要求不高，還可直接用樣品的粗提物點樣。實驗時溶劑用量少，更換容易，實驗成本較低。

 

    ⑤在獲得典型色譜圖后，既可以直接掃描進行測定，也可通過彩色攝影制成彩色圖譜或利用計算機圖像處理系統(tǒng)進行處理后作為規(guī)范文件保存。

 

    二、薄層色譜技術(shù)發(fā)展演變歷程

 

    薄層色譜法是20世紀50年代從經(jīng)典柱色譜法及紙色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種色譜技術(shù)。進入20世紀60年代后，人們對薄層色譜法在使用器材的不斷改進、操作技術(shù)水平的不斷提高等方面進行了大量的工作，如薄層板的制備和點樣裝置的從手工逐步過渡到自動，從人工控制到機械化自動控制，使薄層色譜法的操作精度日益提高，因而也就為該項技術(shù)在中藥及其制劑中各類化學物質(zhì)的定性與定量分析中的廣泛應用提供了技術(shù)支持條件。

 

    特別是在近20年來，隨著計算機技術(shù)的不斷滲透，人們對薄層色譜法在縮短分離時間、提高分離效率、提高檢測靈敏度、保證定量精度及擴大應用范圍等方面不斷進行研究，使該方法不僅在儀器設備上不斷完善，而且在技術(shù)水平上取得了突破性進展。主要有以下幾個方面的突出表現(xiàn)。

 

    方面，薄層色譜與其他分離分析技術(shù)聯(lián)用，更加拓寬了薄層色譜技術(shù)的適用范圍。比如，與其他色譜法聯(lián)用從而產(chǎn)生了薄層色譜與高效液相色譜法聯(lián)用、薄層色譜與氣相色譜聯(lián)用、HPLC-GC/MS-TLC聯(lián)用、高速反流色譜與薄層色譜聯(lián)用等技術(shù)。這些聯(lián)用技術(shù)有效地解決了一些組成復雜而含量又極微的化學成分分離的技術(shù)難題。

 

    第二方面，薄層色譜與其他分析檢測儀的聯(lián)用，增加了分析檢測的準確性和精密度。這樣不僅可以強化其定性的功能，而且還可以對樣品中被分離的一種或多種成分進行在線聯(lián)用定量分析，這與以往將斑點從薄層上刮下后再與各種光譜聯(lián)用相比，其準確性和精密度都有顯著提高。

 

    比如，薄層色譜--紫外可見光譜掃描儀(如CamagII型薄層掃描儀/HP300計算機系統(tǒng))，在光源允許的范圍內(nèi)，可選擇多達9種波長，依次自動掃描，從而獲得三維光譜的薄層色譜圖，人們可以利用不同顏色繪制的三維圖，直觀地看到各組分在不同波長的吸光強度及其變化情況，選定波長時同時掃描測定樣品中各成分的含量。

 

    此外，還有薄層色譜法與光譜法聯(lián)用而產(chǎn)生的薄層色譜與原子吸收光譜聯(lián)用、薄層色譜與紅外光譜聯(lián)用、薄層色譜與拉曼光譜聯(lián)用、薄層色譜與光聲光譜聯(lián)用、薄層色譜與質(zhì)譜聯(lián)用、薄層色譜與核磁共振聯(lián)用和薄層色譜與數(shù)字自動化放射自顯影聯(lián)用等技術(shù)。通過這些技術(shù)的聯(lián)用，人們可以獲取豐富的被測化合物的結(jié)構(gòu)信息，也使薄層色譜的定性功能得到了進一步的加強。

 

    類似這樣的聯(lián)用技術(shù)還包括與電化學法聯(lián)用而出現(xiàn)的薄層色譜法與方波陽極伏安法聯(lián)用、薄層色譜法與脈沖極譜法聯(lián)用、薄層色譜與庫侖滴定法聯(lián)用等技術(shù)，它們在解決復雜的中藥化學成分檢測的問題方面均獲得了滿意的結(jié)果。

 

    第三方面，薄層色譜照相技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的一項攝影技術(shù)，主要是對經(jīng)過色譜的薄層板，在燈光(日光)或一定波長的紫外光下，將可見光或熒光斑點完整地以照片形式記錄下來，從而得到一張性的薄層色譜圖，它記錄了薄層色譜的所有信息。近年來利用數(shù)碼技術(shù)直接將圖像信息輸入計算機內(nèi)進行儲存和打印，不僅提高了薄層圖像的質(zhì)量，而且還保證了薄層色譜數(shù)據(jù)資料的規(guī)范性。