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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6419 |
商品介紹
測(cè)定意義 PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 測(cè)定原理: PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
Saccharomyces cerevisiae早期應(yīng)答基因3檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae果膠檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae纖維素檢測(cè)試劑盒
Rhodotorula glutinis抗硬皮病70檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae非受體型蛋白2檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiaeATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae干燥綜合征抗原A1檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae肉堿軟脂?;D(zhuǎn)移1檢測(cè)試劑盒
多酚氧化酶(PPO)微量法檢測(cè)試劑盒銅標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/l,溶劑:1%硫Anti-B7-DC/PDL2/CD273 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體2抗體IgG雞顆粒A(GzmA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
水質(zhì)鈷標(biāo)樣 濃度范圍:1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-B7-H1/PDL1/CD274 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體1抗體IgG雞抗補(bǔ)體1q抗體(C1q-Ab)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-B7-H4/FITC 熒光素標(biāo)記B7H4抗體IgG雞γ干擾素(IFN-γ) 聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
水質(zhì)鎘標(biāo)樣 0.1mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品 Anti-BACE/ASP2 /FITC 熒光素標(biāo)記β分泌抗體IgG雞解整合素金屬蛋白10(ADAM10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:水Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG雞跨膜絲氨蛋白2(TMPRSS2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液水質(zhì)總鉻標(biāo)樣,0.447-1.70mg/LAnti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG雞表皮角蛋白(EK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1059mg/L,溶劑:Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG雞心肌營(yíng)養(yǎng)素樣因子1(CLCF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-p-BAD/FITC 熒光素標(biāo)記抗化相關(guān)死亡促進(jìn)因子p-BAD抗體IgG雞胃蛋白(PP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鄰酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-BAD(phospho Ser75,Ser99,Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG雞D-多巴色素變位(DDT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
水質(zhì)鈣標(biāo)樣 濃度范圍:1.51-14.8(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品 Anti-Phospho-Bad(Ser136) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG雞補(bǔ)體成分9(C9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四化碳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-Phospho-Bad(Ser155) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體IgG雞Bcl2關(guān)聯(lián)永生因3(BAG3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
三標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-BADH2/FITC 熒光素標(biāo)記BADH2抗體IgG雞骨形成蛋白6(BMP-6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液 用于水分析,1000ug/ml的溶液Anti-BAFF/CD257/FITC 熒光素標(biāo)記TNF家族B激活因子抗體IgG雞足盂蛋白(PCX)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:1%鹽Anti-BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標(biāo)記B活化因子受體抗體IgG雞滑行蛋白α(TXLNa)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,溶劑:1%硝Anti-Bak/FITC 熒光素標(biāo)記Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體IgG雞多配體聚糖4(SDC4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。