測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6417 |
商品介紹
測(cè)定意義 GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 測(cè)定原理: GOD催化產(chǎn)生H2O2,過氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。 試驗(yàn)中所需的儀器和設(shè)備: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
效應(yīng)蛋白受體1抗體Human MBLAC2 (Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 2) ELISA KIT人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒,HBV preS2Ag ELI
早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體Human MTCH1 (Mitochondrial carrier homolog 1) ELISA KIT人α1抗胰蛋白(α1-AT)ELISA試劑盒,α1-AT ELISA
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體Human MAVS (Mitochondrial antiviral-signaling protein) ELISA KIT人吡哆醛/吡哆醇B6激(PDXK)ELISA試劑盒,
真核翻譯起始因子4E抗體Human MBOAT1 (Lysophospholipid acyltransferase 1) ELISA KIT兔子中性粒彈性蛋白(NE)ELISA試劑盒,
核輸出蛋白5抗體Human MTHFSD (Methenyltetrahydrofolate synthase domain-containing protein) ELISA KIT緩沖MUG瓊脂
腸致病性大腸桿抗體Human MFRP (Membrane frizzled-related protein) ELISA KIT液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 用于藥品,生物制品無試驗(yàn),培養(yǎng)、厭氣(GB標(biāo)準(zhǔn)) 2005版藥典
E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human MMGT1 (Membrane magnesium transporter 1) ELISA KIT豆腐果新苷B Helicianeoide B
睪酮調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體Human MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) ELISA KIT對(duì)基-β-D-葡萄糖苷
葡萄糖氧化酶(GOD)微量法檢測(cè)試劑盒乙烯菌核利 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%魚白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒整合素αVβ6抗體GABABR1 gamma氨丁B型受體1抗體
乙烯菌核利標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮魚白介素12(IL-12)免疫試劑盒白介素11受體α/IL-11Rα抗體GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨丁運(yùn)載蛋白1抗體
乙烯菌核利標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮魚白介素10(IL-10)免疫試劑盒免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1抗體GABA 兔抗γ1氨丁抗體
滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%魚γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒KB抑制蛋白激α/β抗體 IKK α/IKK βGab2 接頭蛋白Gab 2抗體
滅草猛 分析標(biāo)準(zhǔn)品
魚CD8分子(CD8)免疫試劑盒干擾素α11抗體Gab1 接頭蛋白Gab 1抗體
二硅油DC-200 GC,粘度~350 mPa.s, neat(25 °C)魚CD4分子(CD4)免疫試劑盒干擾素α10抗體G6PDH/H6PD 己糖6脫氫抗體
二硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)魚5羥色/血清素/血清(5HT/ST)免疫試劑盒干擾素α受體2抗體G6PD/Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 葡萄糖-6脫氫抗體
二硅油DC-200 粘度~20 mPa.s, neat(25 °C)魚Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒干擾素α21抗體G3BP1 Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體
二硅油DC-200 粘度~50 mPa.s, neat(25 °C)魚17-羥孕烯酮免疫試劑盒干擾素α4抗體G protein beta subunit like G蛋白β樣蛋白抗體
二硅油DC-200 粘度~100 mPa.s, neat(25 °C)魚17-α睪酮(17-αMT)免疫試劑盒干擾素α16抗體G protein beta subunit GI G蛋白/鳥苷結(jié)合蛋白抗體
二硅油DC-200 粘度~200 mPa.s, neat(25 °C)魚17α,20β羥孕酮(17α,20βOH-PROG)免疫試劑盒衍生透明質(zhì)相關(guān)蛋白抗體G protein beta 4/GNB4 G蛋白β4抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞4
二硅油DC-200 粘度~500 mPa.s, neat(25 °C)魚11-酮類固免疫試劑盒肌聚鹽樣蛋白1抗體G protein beta 3/GNB3 G蛋白β3抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞3
二硅油DC-200 粘度~1000 mPa.s, neat(25 °C)魚11-酮睪酮(KT)免疫試劑盒胰島素誘導(dǎo)因2抗體G protein beta 2/GNB2 G蛋白β2抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞2
二硅油DC-200 粘度~30000 mPa.s, neat(25 °C)魚(鮭魚)瘦素(LEP)免疫試劑盒HHG2抗體G protein beta 1/GNB1 G蛋白β1抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞1
二硅油DC-200 粘度~60000 mPa.s, neat(25 °C)羊ELISA試劑盒干擾素α17抗體G protein alpha S G蛋白αS抗體(核苷結(jié)合蛋白Gα s)