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人β羥丁酸elisa試劑盒說明書

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  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2018-02-07
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9340
  • 人氣值304809
產(chǎn)品標(biāo)簽

人β羥丁酸β-OHBelisa試劑盒

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同類產(chǎn)品

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人β羥丁酸elisa試劑盒說明書 產(chǎn)品詳情

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(1)、高效、靈敏、特異的抗體;
(2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
(4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
(5)、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。  

                  產(chǎn)品名稱

            英文縮寫

  規(guī)格

人β羥丁酸elisa試劑盒說明書

β-OHBELISAKit

48T/96T

人β羥丁酸elisa試劑盒說明書 英文縮寫:β-OHBELISAKit  特點(diǎn):靈敏性高,高效性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產(chǎn)品。 常用試劑名稱:人β羥丁酸(β-OHB)elisa檢測(cè)試劑盒  規(guī)格: 48T/96T。

人β羥丁酸elisa試劑盒說明書 樣品收集、處理及保存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人β羥丁酸elisa試劑盒說明書 技術(shù)流程:

        雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

        間接法(檢測(cè)未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml4 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml37 孵育0.51小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,37孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3
、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37孵育30-60分鐘,洗滌,Z后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37 1030分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

人β羥丁酸elisa試劑盒說明書 操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。 7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,再加入顯色劑 B 50ul
8. 終止:25-37下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。
9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 注:讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的 30 分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
數(shù)據(jù)計(jì)算
1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即減去空白孔 OD 值,以 6 個(gè)標(biāo)準(zhǔn) 品的 OD 值為縱坐標(biāo) y,以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo) x,繪制曲線圖,如圖示, 并計(jì)算出回歸方程 y=ax+b。
2. 將待測(cè)樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算各組樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即 為樣品的實(shí)際 ABP 濃度。
3. 敏感度:1.0 pg/ml
人β羥丁酸elisa試劑盒說明書售后服務(wù):
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的。(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測(cè)不出結(jié)果,等等!)
2.
全程技術(shù)指導(dǎo)。(包括售前的標(biāo)本收集,使用過程中不明白的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電)
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提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時(shí)間是5天左右)
4.
客戶有任何問題,我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
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