測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6489 |
商品介紹
測定意義 NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內神經、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內的信息物質,發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。 測定原理: NO在體內或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個樣品需做對照管。 自備實驗用品及儀器: 天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
10號染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒, PCA-1/Yo ELISA
19號染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人葡萄球蛋白A(SPA)ELISA試劑盒, SPA ELISA
19號染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人單氧化(MAO)ELISA試劑盒,MAO ELISA
N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人二氫嘧樣2(DPYSL2)ELISA試劑盒,
19號染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒,
19號染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒,
19號染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒,
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒,
NO含量可見分光光度法檢測試劑盒4-氟 99%兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)免疫試劑盒鈣離子通道a1F亞型抗體Rabbit Anti-mouse IgG/APC APC標記的兔抗小鼠IgG
2-氟-4-(三氟) 97%兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒鈣調B亞B1抗體Rabbit Anti-mouse IgG/AP 堿性(AP)標記的兔抗小鼠IgG
3-羥 97%兔抗平滑肌抗體(ASMA) 免疫試劑盒鈣調蛋白激激α抗體CaMKKαRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgG
2-羥 97%兔抗III(SERPINC1)免疫試劑盒環(huán)腺苷應答元件結合蛋白H抗體Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgG
3-羥 97%兔抗腦組織抗體(ABAb)免疫試劑盒化周期檢測點激1抗體Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgG
4-異喹啉鹽鹽 98%兔抗內皮抗體(AECA)免疫試劑盒鈣激活蛋白12抗體Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG
4-異 98%兔抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框134抗體Rabbit anti-mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清
4-異氧 98%兔膠原吡交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒B粘附分子CD239抗體Rabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG
6-氧-2-萘 97%兔降鈣素原(PCT)免疫試劑盒胰羧肽B2抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗猴IgM
4-氧-2-三氟 96%兔降鈣素因相關肽(CGRP)免疫試劑盒視網膜色素變性蛋白26抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗猴IgM
3-氧羰 97%兔狀旁(PTH)免疫試劑盒過氧化物體肉堿酰轉移抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗猴IgM
4-酯 97%兔質衍生因子-1(SDF-1/CXCL12)免疫試劑盒16號染色體開放閱讀框7抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗猴IgM
4-氧-2- 97%兔質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒16號染色體開放閱讀框57抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/Gold 膠體金標記的兔抗猴IgM
2-硫 98%兔質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒3號染色體開放閱讀框37抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/FITC FITC標記的兔抗猴IgM
3-硫 97%兔環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒3號染色體開放閱讀框49抗體Rabbit Anti-Monkey IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgM