公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X0774 |
商品介紹：
名稱 小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞 2.組織來源：甲狀腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞分離自甲狀腺組織；甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體，屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動物身體中，它位于頸部甲狀軟骨下方，氣管兩旁。甲狀腺表面有結(jié)締組織被膜，表面結(jié)締組織深入到腺實質(zhì)，將實質(zhì)分為許多不明顯的小葉，小葉內(nèi)有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞。甲狀腺控制使用能量的速度、制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)機體對其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠制造甲狀腺素來調(diào)整這些反應(yīng)，有T3和T4。這兩者調(diào)控代謝、生長速率還有調(diào)解其他的身體系統(tǒng)。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲狀腺也生產(chǎn)降鈣素，調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的平衡。其中，甲狀腺濾泡上皮細胞（也稱為濾泡細胞或主要細胞）是在甲狀腺細胞是負責(zé)生產(chǎn)和分泌甲狀腺激素，甲狀腺素（T4）和三碘甲狀腺原氨酸（T3）。 5.方法簡介： ()實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： ()實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞經(jīng)TG（甲狀腺球蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M022 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
改良EC肉湯(mEC+n)顆粒 Modified EC Broth 225ml/袋*10 1.57-100 ng/mL 人無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒
100µL 即用型GFP標(biāo)簽蛋白裂解液 GFP-Tagged Protein Lysate -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人二肽基肽Ⅳ(DPP-Ⅳ)ELISA試劑盒
2 ug pTCK303 pTCK303 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移1(POMT1)ELISA
小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞100U Klenow 片段
Caspr2 軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體（少突膠質(zhì)細胞） 規(guī)格: 0.2ml
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（FT） Thiolglycollate Medium 250g
JNK1/2/3 氨基末端激1/2/3抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH2 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
SUPT16H/CDC68 染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 規(guī)格: 0.2mlHIF-1 Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1α 規(guī)格: 0.1ml
LIR-6 白細胞免疫球蛋白樣受體6抗體 規(guī)格: 0.2ml
MLN/Motilin 胃動素抗體 規(guī)格: 0.1ml
ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
MFSD2A 促進調(diào)解蛋白家族2A抗體 規(guī)格: 0.2ml
FGF13 纖維母細胞生因子13抗體 規(guī)格: 0.2ml
Securin/PTTG 垂體瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 規(guī)格: 0.1mlALR 肝再生增強因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM50A FAM50A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
