公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒
描述:由于 miRNAs 分子序列較小,僅 20nt 左右,沒有 真核生物有的 Poly(A)尾巴結(jié)構(gòu),采用傳統(tǒng) Oligo dT 引 物和隨機引物很難獲得從 miRNA 到 cDNA 的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn) 物。 公司開發(fā)出一套全新的加 A 法 miRNA 反轉(zhuǎn) 錄試劑盒,基于 Peter 改良的 miR-Q 技術, 可以對成熟的 miRNA 同時完成加 A 反應和反轉(zhuǎn)錄反應, 直接獲得含有特異性 tag 和 15(T)的 cDNA 產(chǎn)物(如圖 1 所示)。該方法使得 miRNA 反轉(zhuǎn)錄與 mRNA 的反轉(zhuǎn)錄一 樣輕松。直接將提取的 miRNA 與反應緩沖液混合物混合, 并置于 PCR 儀上 1 小時即可獲得高濃度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 產(chǎn)物。獲得的 cDNA 產(chǎn)物適用于 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進行定量檢測,該方法 已被大量文獻所采用。
儲存:請置于-20°C,可保存 2 年;避免反復凍融
操作方法
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應液
miRNA(0.01-0.1 μg)or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特別說明: 10×miRNA RT Primer 引物為
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’,定量擴增
用特異性上下游引物進行擴增,圖 2 是以 hsa-miR-21 為
實例說明特異性上下游引物的設計方法
2. 在 PCR 儀上按以下條件進行反應:
37°C 60min
95°C 5min
3. 獲得 cDNA 產(chǎn)物后使用 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進行 miRNA 定量檢測。
公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指/環(huán)指蛋白4封閉多肽 | 黃芩染料法PCR鑒定試劑盒 |
丙型副傷PCR試劑盒 | 補體因子IELISA試劑盒 |
人E選擇su(E-Selectin/CD62E) ELISA試劑盒 | 吡哆醛/吡哆醇B6磷suanmeiELISA試劑盒 |
人谷草轉(zhuǎn)氨mei2,線粒體(谷草轉(zhuǎn)氨mei2)(GOT2)ELISA試劑盒 | Ⅲ型膠原蛋白ELISA試劑盒 |
人分泌型磷脂meiA2(sPLA2)試劑盒elisa | 胞裂蛋白6ELISA試劑盒 |
人甲狀旁腺激su1-34(PTH 1-34)抗體ELISA檢測試劑盒 | 甘露聚糖結(jié)合凝集su絲氨suan肽1ELISA試劑盒 |
FSTL3/FLRG蛋白封閉多肽 | 人乳頭瘤病毒高危型PCR檢測試劑盒 |
溶質(zhì)載體家族蛋白17成員A2封閉多肽 | 人Her/neu基因PCR檢測試劑盒 |
B淋巴細胞新型蛋白1封閉多肽 | 禽傳染性支氣管炎病毒PCR檢測試劑盒 |
重組雞MIER3L蛋白 | 斯氏毛滴蟲PCR檢測試劑盒 |
CCZ1蛋白封閉多肽 | 藍氏賈第鞭毛蟲型PCR檢測試劑盒 |
背根神經(jīng)節(jié)同源蛋白DRGX封閉多肽 | 一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒人類嗜淋巴細胞病毒型PCR檢測試劑盒 |
脂蛋白受體相關蛋白/低密度脂蛋白相關蛋白的相關蛋白1封閉多肽 | 人多瘤病毒9 PCR試劑盒 |
天冬氨suan-特異性蛋白mei家族封閉多肽 | 萊氏泰勒蟲PCR試劑盒 |
鋅金屬蛋白meiSTE24同源蛋白封閉多肽 | 狼源性成分PCR試劑盒 |