公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品介紹:
血清血漿TaqMan miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒血清血漿 TaqMan miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒采用加 A 法進行反轉(zhuǎn)錄,加 A 法的反轉(zhuǎn)錄效率遠高于莖環(huán)法,因此,采用該方法可極大的提高檢測靈敏度(原理見圖 1)。該試劑盒操作簡單,僅需要兩步即可輕松完成miRNA 的 cDNA 合成,合成的 cDNA 可用于所有 miRNA的后續(xù)定量檢測。反轉(zhuǎn)錄完畢后采用特異性的上游引物和接頭引物進行 PCR 擴增,F(xiàn)AM 標記 TaqMan 探針作為熒光報告基團進行定量檢測(原理見圖 1)。 的血清血漿 TaqMan miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒專用于血清血漿 miRNAs 分子的反轉(zhuǎn)錄試驗(不可用于組織和細胞),轉(zhuǎn)錄獲得的 cDNA 產(chǎn)物用于 TaqMan 定量 PCR 方法檢測 miRNAs 分子(僅適用 TaqMan miRNA 定量 PCR 試劑盒,。
儲存:請置于-20°C,可保存 2 年;避免反復(fù)凍融
操作方法
1 按以下組分在 0.2 ml EP 管中配制應(yīng)液血清血漿 miRNA 10 μl5×TaqMan miRNA RT Solution A 2.5 μl
2 在 PCR 儀上按以下條件進行加 A 反應(yīng):37°C 30min 85°C 5min
3 反應(yīng)完畢后,在上述 12.5μl 反應(yīng)體系中加入如下試劑,并混合均勻。
10×PS TaqMan miRNA RT Primer 2.5 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2.5 μl
H2O 7.5 μl
4 在 PCR 儀上按以下條件進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)30°C 5min 55°C 60mi 95°C 5min獲得的 cDNA 產(chǎn)物可用于多個目標 miRNA 的檢測。通常取2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR 試劑盒檢測該試劑盒有一萬余種,詳細列表可查詢HG TaqMan miRNA qPCR kit.xls)。
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