商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6962 |
商品介紹:
測(cè)定意義
皂苷(Saponin)是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷,主要分布于陸地高等植物中,也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。
測(cè)定原理:
使用超聲波提取樣品中的皂苷,利用-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、烘箱、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超聲清洗器
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
HERPUD蛋白家族成員2抗體Human SIGLEC7 ELISA Kit鹽酸咪唑雜質(zhì)
尿黑酸氧化抗體Human SIGLEC9 ELISA Kit
肝生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子激底物抗體Human SIGMAR1 ELISA Kit重去腺素
T2識(shí)別黑色素瘤抗原抗體Human SIKE1 ELISA Kit
肝癌HHCM蛋白抗體Human SIL1 ELISA Kit豆腐果苷
紫外切除修復(fù)蛋白RAD23A抗體Human SHOX ELISA Kit醋酸鈉
紫外切除修復(fù)蛋白RAD23B抗體Human SH3GL2 ELISA Kit決明子LAMP鑒定試劑盒
3-羥基異丁酸脫氫抗體Human SIM2 ELISA Kit大鼠甲狀旁腺(PTH) Elisa測(cè)定試劑盒
總皂苷含量微量法檢測(cè)試劑盒猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒*直銷
纖維介素蛋白(fgl2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠γ分泌免疫試劑盒*直銷
小鼠甲狀腺素(T4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
山羊雌激素(E)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
猴β干擾素(IFN-β)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒*直銷
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。