細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
膀胱移行上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細(xì)胞 | GOY-01X0935 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 膀胱移行上皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源:膀胱組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人膀胱上皮細(xì)胞分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過(guò)濾屏障內(nèi)壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,進(jìn)而影響腎臟病變。
5.方法簡(jiǎn)介:
()實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱移行上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
()實(shí)驗(yàn)室分離的人膀胱移行上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號(hào)CM-H068
換液頻率每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
傳代特性可傳2-3代
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactobacillus Carbohydrate Fermentation Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myosin-binding protein C, cardiac-type
1瓶 22RV1細(xì)胞株 22RV1 低溫運(yùn)輸和保存 1.56-100 U/mL 人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒
50T 豬細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit
膀胱移行上皮細(xì)胞Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml
MST1 蛋白激MST抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF187 環(huán)指蛋白187抗體 規(guī)格: 0.2ml
Lumican 基膜聚糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNeuroligin 1 突觸細(xì)胞粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nur77/GFRP 孤兒核受體蛋白Nur77抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml
Phospho-Paxillin(Ser178) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1ml
C9orf152 9號(hào)染色體開放閱讀框152抗體 規(guī)格: 0.2ml
CRHR2 促上皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 規(guī)格: 0.2ml
1 管 MDS 42recA大腸桿菌 MDS 42recA Strain 4℃保存
2 ug pFLD-cat A+ pFLD-cat A+ 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
液體雙抗增菌液 Liquid Double Anti Bacteria 250g
200 mL 小鼠胰島細(xì)胞分離液1.072 Cell Separation Solution -20℃保存