參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:表皮葡萄球菌(SE)熒光-PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光-PCR法
貨號:CP99923
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
1050506-75-6 GPR120 modulator 1 5mg 小麥源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1050506-87-0 GPR120 modulator 2 10mg 胡蘿卜源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1050506-87-0 GPR120 modulator 2 200mg 胡桃源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1050506-87-0 GPR120 modulator 2 50mg 胡桃源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
1050506-87-0 GPR120 modulator 2 5mg 胡蘿卜源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度
乙酰黃芪皂苷IAcetytastragaloside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98% 小鼠吻素受體(KISS1R)ELISA試劑盒 ,英文名: KISS1R ELISA Kit ELISAKitCoisol小鼠皮質(zhì)醇規(guī)格:48T/96T
5-苯基-2,4-戊二烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品)5-Phenyl-2,4-pentadienoic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA檢測試劑盒RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISAKit 96T/48T Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit人抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
米爾貝1Milbemycin oxime質(zhì)量規(guī)格:A3+A4>97% 牛纖調(diào)蛋白(FMOD)試劑盒 Bovine fibromodulin,FMOD ELISA Kit 人1酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
伐地考昔Valdecoxib質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)規(guī)格:96T/48T 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISA Kit
表皮葡萄球菌(SE)熒光-PCR法檢測試劑盒TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷Thymidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
牛腦垂體提取物BPEDBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC))N-(1-Pyrenyl)maleimide質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
CHL-Don 中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞愛維莫潘Alvimopan質(zhì)量規(guī)格:刪除;精神管制
CL-0046C4-2(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-磺炳基十四烷基二甲甜菜堿Myristyl sulfobetaine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對照。