公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]
技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 NCI-H460細胞株從一位大細胞肺癌患者的胸水中建立。 細胞表達的p53 mRNA易于檢測,其水平與正常肺細胞相當,未表現出DNA總體結構異常。 角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性,神經絲三聯體蛋白陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(139+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:13;D16S539:9;D18S51:13,15;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:21,23;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17
同工酶
染色體
使用權限 A類人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
Hemopexin/HPX 糖蛋白β-1B抗體Trk C 神經生長因子受體的一種(抗原)
LRPAP1/MRAP 脂蛋白受體相關蛋白抗體(低密度脂蛋白相關蛋白的相關蛋白1)TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)() 促甲狀腺素受體(抗原)
MEP1A/Meprin alpha/PPHA 苯甲酸肽水解酶抗體Caspase-8 (pro Mch5) 半*蛋白酶8抗原
METTL11A 甲基化樣蛋白11抗體(N端)TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲狀腺素受體(抗原)
Nicastrin 老年性癡呆蛋白APH2抗體TY3H ( Tyrosine Hydroxylase ) *羥化酶(抗原)
IGFBP9/CCN3 胰島素樣生長因子結合蛋白9Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)
PCSK9/NARC1 神經細胞凋亡調節(jié)轉化蛋白1抗體(前蛋白轉化酶枯草溶菌素9)Cav-1/ETM1 peptide 細胞質膜微囊蛋白-1抗原
PIGR 多聚免疫球蛋白受體抗體Beta-catenin/ Beta-cats β-連環(huán)蛋白抗原(β-β鏈接素)
PRDM2/RIZ1 鋅指蛋白RIZ1抗體p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 磷酸化β-連環(huán)蛋白抗原
PRMT6 組蛋白*甲基轉移酶6抗體Tubulin- Beta 微管蛋白(抗原)
PRSS8 *蛋白酶8抗體NAIF1 protein( CB12-327) 核凋亡誘導因子蛋白1(多肽)
TCF3/E2A/E47 轉錄因子3抗體(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47)cath-B/CB(Cathepsin B) 組織蛋白酶B抗原
phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷酸化轉錄因子3抗體cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
LEPREL2 皮屑樣蛋白2抗體CBFA1/RUNX2 (Ru-related Transcription Factor 2) 成骨特異性轉錄因子(多肽)
LLGL1/2 相似腫瘤抑制基因HUGL抗體CBP(CREB-binding protein) CREB結合蛋白抗原
phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654) 磷酸化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體CBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原
LRP12 低密度脂蛋白受體相關蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7)CBX5(Chromobox Homolog 5) CBX5(多肽)
MCC 大腸癌腫瘤突變蛋白抗體CC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原
MFSD2A 促進調解蛋白家族2A抗體CCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5) CC趨化因子受體2/5抗原
MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原
MTSS1 腫瘤轉移抑制蛋白1CCL5/RAES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T細胞表達和分泌的調節(jié)因子抗原
MTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細胞炎性蛋白1β抗原
NIT1 腈水解酶1抗體MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細胞炎性蛋白3α抗原
RASSF3 Ras相關區(qū)域家族1A抗體CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原
NPR2L/G21 protein G21蛋白質抗體CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14) 嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗原
XAB2/SYF1 XAB2蛋白抗體ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗原
PDGFRL 血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta) 巨噬細胞炎性蛋白19抗原
PDSS2 抑癌蛋白DLP1抗體CCL26(Eotaxin 3) 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗原
PHAP1 蛋白磷酸酶2A抑制劑1抗體CCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原
POU6F2 轉錄因子RPF1抗體CCR-3(CC chemokine receptor 3) CC趨化因子受體3抗原
PRKCDBP 蛋白激酶C delta結合蛋白抗體CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A) 細胞表面趨化因子受體2A抗原
Pinin 橋粒相關蛋白DRS抗體CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細胞表面趨化因子受體4抗原
RASAL1 RAS蛋白樣激活劑1抗體CCR-6/CD196 peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原
RBM5/LUCA15 腫瘤抑制基因LUCA15抗體CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原
RERG Ras相關雌激素調節(jié)生長抑制蛋白CCR-7(CC chemokine receptor 7) CC趨化因子受體7(多肽)
RHOBTB1 Rho相關結構域BTB蛋白質1抗體CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗原