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Camptothecin (5mM)400ul實驗方法

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  • 型號
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2017-07-06
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9968
  • 人氣值79350
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Camptothecin (5mM)400ul

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Camptothecin (5mM)400ul實驗方法 產(chǎn)品詳情

Camptothecin (5mM)400ul實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Camptothecin (5mM)400ul實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2

T-103AI型膠原酶(10mL酶解緩沖液)1mL

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

TU 686細胞,人喉癌細胞 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV-304細胞 中國倉鼠卵巢細胞-二氫*還原酶缺陷型;CHO/dhFr-

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6

CNDP1 Others Human CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠子細胞;U14

IL18R1 Others Canine IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照)

HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系

CEM細胞,白血病細胞 人前列腺癌細胞,PC-3M細胞 人肝內(nèi)膽管上皮細胞總RNAHIBEpiC tRNA

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2

AHSG Others Human Fetuin-A / AHSG / FETUA 人細胞裂解液 (陽性對照)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

前列腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 腹水瘤細胞,SAC-IIC3細胞 EMT6細胞,小鼠細胞

人上皮細胞;MCF-10A

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小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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