細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠內臟脂肪細胞直銷 | T25m2 | CS-963929 |
大鼠內臟脂肪細胞【Rat Fat: Normal Visceral Fat Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
動物鱗片(Scales)組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 醋酸鎂四水(分子生物學級) Magnesium acetate, tetrahydrate 質量規(guī)格:>99%,分子生物學級
動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒20 二氫鈉一水(ACS級) phosphate, monobasic, monohydrate 質量規(guī)格:ACS級,>98.5%
動物腦組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 葡萄糖酸鈣 Calcium gluconate, hydrate 質量規(guī)格:>99%
動物內皮細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂酰基麥芽糖苷 N-Dodecyl-b-maltoside 質量規(guī)格:>99%,分子生物學級
動物皮膚組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 鹽酸氨基脲 Aminourea 質量規(guī)格:>98%,BR
動物脾臟組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 硫酸鏈霉素滅菌溶液,30 mg/ml Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml 質量規(guī)格:Sterile滅菌溶液,30mg/ml
動物前列腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 乙酰胺 Acetamide 質量規(guī)格:>98%
動物全血高質化線粒體分離試劑盒10 萘乙酰胺(AR) 1-Naphthylacetamide 質量規(guī)格:AR,>98%
動物全血活性線粒體分離試劑盒10 鐵屑(>98%,BC) Iron granules 質量規(guī)格:>98%,BC
動物全血線粒體粗提分離試劑盒10 檸檬酸鐵(>98%,BR) Iron(III) 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠凝血因子XIII B(F13B)ELISA試劑盒 ,英文名: F13B ELISA Kit 鉬酸 Molybdic acid 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T 甲磺酸依普羅沙坦;依普沙坦 Eprosartan mesylate 質量規(guī)格:>98%,血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑
人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae(Cpn)aibody(IgG)ELISA Kit 鹽酸苯甲脒 Benzamidine HCl 質量規(guī)格:>98%,BR
RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化鉻;三氯化鉻 Chromium(III) chloride 質量規(guī)格:>98%
COLLAGENI蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 肌酸一水 Creatine, monohydrate 質量規(guī)格:>98%,BR
MouseMyosin,MYSELISA試劑盒小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 右旋糖苷/葡聚糖10 Dextran-10 質量規(guī)格:M.W:10000
小鼠凝血因子XIII A1(F13A1)ELISA試劑盒 ,英文名: F13A1 ELISA Kit 檸檬酸鐵銨 Ammomium ferric 質量規(guī)格:AR
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒Mouseapoprotein,apo-A1ELISAKit 96T/48T 氯化膽堿 Choline chloride 質量規(guī)格:>98%,適用于細胞培養(yǎng)
人肺特異性X蛋白(LUNX)試劑盒 Human LUNX ELISA Kit D-葡萄糖酸內酯 D-Gluconolactone 質量規(guī)格:>99%
Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯吡脲;氯吡苯脲;吡效隆 Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠內臟脂肪細胞直銷動物肺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 磷脂酶A2 Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom 質量規(guī)格:比活性:>200U/mg,BC
動物肝細胞分離培養(yǎng)試劑盒5 磷鎢酸鈉(>98%,BC) phosphotungstate, hydrate 質量規(guī)格:>98%,BC
動物肝星狀細胞分離培養(yǎng)試劑盒5 鋅四水(>98%,BR) Zinc phosphate tetrahydrate 質量規(guī)格:>98%,BR
動物肝組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 腺嘌呤,維生素B4 Adenine phosphate 質量規(guī)格:>98%,BR
動物骨DNA萃取試劑盒20 西他列汀一水(標準品) Sitagliptin phosphate monohydrate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
動物骨組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 西他列汀一水 Sitagliptin phosphate monohydrate 質量規(guī)格:≥98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
動物肌肉組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 西他列汀 Sitagliptin Phosphate 質量規(guī)格:美國進口
動物甲狀腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 泰樂菌素 Tylosin phosphate 質量規(guī)格:>95%,BR
動物結組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三乙酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC)) Triethyl phosphate 質量規(guī)格:Standard for GC,>99.7%(GC)
動物鱗片(Scales)組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 三辛酯(標準品) Tri(2-ethylhexyl)phosphate 質量規(guī)格:分析標準品
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。