培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：蘇木素伊紅染色試劑盒
英文名稱：
產品規(guī)格：200ml
貨號：FS-X9841
產品介紹:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色，簡稱HE染色，是病理學常規(guī)制片中基本的染色方法，應用極其廣泛。蘇是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶，是一種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細胞核染色。 蘇木素染色液是采用進口的高純度蘇、氧化劑等優(yōu)質試劑原料和經典配方配制，染色液內不使用汞、甲醇等有毒試劑，其特點是不易產生沉淀和金屬; 應用范圍廣，可以用于人、動物、畜牧、水產等領域，用于組織切片或培養(yǎng)細胞的染色。蘇木素染色液染色后細胞核呈藍紫色。本染色液可以重復使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。 伊紅染色液是采用優(yōu)質試劑原料和經典配方配制，用于組織切片或培養(yǎng)細胞的染色。伊紅染色液染色后細胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以重復使用，直至效果不佳時再換用新的染色液。 儲存條件：室溫避光保存。 有效期：一年。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
磺倍他司汀英文名： Finasteride后期促進復合蛋白3抗體包裝25g
磺多沙唑英文名： Fleroxacin磷化CRK抗體包裝5g
磺酚妥拉明英文名： Fleroxacin鈣粘蛋白6抗體包裝1g
磺依普羅沙坦;依普沙坦英文名： Flucytosine鈣粘蛋白23抗體包裝250mg
基多巴英文名： Flucytosine小腦變性相關蛋白2抗體包裝1g
美托洛爾英文名： Flurbiprofen分裂周期2相關蛋白激7抗體包裝5g
普利英文名： FlurbiprofenA型產氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)包裝100mg
拉羅皮蘭,MK0524英文名： Flurbiprofen磷化角蛋白18抗體包裝50mg
西地平英文名： Fosfomycin Calcium胞嘧啶脫抗體包裝10g
諾普利英文名： Fosfomycin sodiumC2GNT3蛋白抗體包裝250g
樂卡地平鹽鹽英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝50g
普利英文名： Gatifloxacin磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g
雷諾英文名： Gefitinib腫瘤標志物CYFRA21-1抗體包裝500g
利奧西呱，BAY 63-2521英文名： Gefitinib磷化原癌基因c-Jun抗體包裝100g
貝丁酯;貝特英文名： Gemcitabine HCl周期A1蛋白抗體包裝1ml
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumannii 質量規(guī)格：>98%,BR葉受體α試劑盒23-乙酰澤瀉B;Alisol B 2
亮白曲霉Aspergillus│candidus 質量規(guī)格：>99%葉試劑盒鹽小檗堿; Berberine hyd
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品氧還原蛋白過氧化物4試劑盒異補骨脂;Isopsoralen
蘇木素伊紅染色試劑盒貴州綠僵 2,2′,4,4′,5,5′-六聯苯鈣蛋白1
土曲霉 3,5-二苯甲美麗線蟲凋亡基因
溜曲霉 3-芐氨基己內酰保護
尖枝革 3,4-二聯苯S100鈣結合蛋白A6
短鏈諾卡氏 10-順-十七碳烯線粒體核糖體蛋白L41
赤曲霉 磺多辛金屬硫蛋白2
臭紅菇 2-噻唑-5-甲CD5分子樣蛋白
Pseudomonas fluorescens PfO-1 二十四烷甲酯血小板型磷果糖激
成團泛 鹽甲苯噻葡萄糖調節(jié)蛋白-94
枯草芽孢桿 位十二內酯S100鈣結合蛋白PBP
放射形根瘤 特布他林半硫鹽14-3-3蛋白
谷棒桿Ⅲ型 4-溴-3-苯鈣激活中性蛋白1
中慢生華癸根瘤 2,3-二-6-氟苯甲琥珀脫氫1-1
庫爾勒海洋桿 苯并(k)熒蒽抑絲蛋白1
香菇 苯并(b)螢蒽C4BPA
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
