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產品介紹:
臺盼藍染色液主要用于細胞染色，用來檢測細胞的存活率。臺盼藍受到活體細胞的排斥，而死亡細胞攝入染料顯示藍色。通過常用的光學顯微鏡可以觀察到細胞染色情況，同時可以定量計數，實現對細胞存活率比較精確的定量分析。 儲存條件：4℃保存。 有效期：一年。 |
中文名稱：臺盼藍染色液
英文名稱：
產品規(guī)格：100T
貨號：FS-X9839
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
乙阿比特龍酯英文名： Dorzolamide HCl富含半胱C端蛋白1抗體包裝5g
異環(huán)磷酰英文名： Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗體包裝1g
扎西他濱,2',3'-二脫氧胞英文名： Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗體包裝5g
子囊霉英文名： Doxorubicin HCl/Adriamycin19號染色體開放閱讀框29抗體包裝1g
紫杉英文名： Doxorubicin HCl/Adriamycin磷化p21蛋白抗體包裝250mg
左亞葉鈣；酰四氫葉鈣英文名： Doxycycline HCl磷化周期檢測點激2抗體包裝25g
阿卡地新(AICAR)英文名： Doxycycline HCl磷化鈣/鈣調依賴蛋白激2α抗體包裝5g
阿利克侖半富馬鹽英文名： Menadione磷化周期依賴性激2抗體包裝100g
阿齊沙坦英文名： Menadione磷化周期檢測點激1抗體包裝25g
阿司，阿西莫司英文名： Econazole nitrate磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g
折地平英文名： Econazole nitrate磷化α-連環(huán)蛋白抗體包裝5g
安倍生坦英文名： Entecavir周期E2抗體包裝5g
力農英文名： Entecavir磷化鈣/鈣調依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體包裝250mg
地平英文名： Epalrestat 腫瘤易感候選基因3抗體包裝100g
奧美沙坦；奧美沙坦英文名： Epirubicin HCl磷化腫瘤易感候選基因3抗體包裝25g
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質量規(guī)格：>98%,BR胰島淀粉樣多肽試劑盒鹽堿;Ephedrine hydr
CBS7227=IFO10179資源名稱: 假白布勒酵母 質量規(guī)格：>95%脂溶性的原激活肽試劑盒原人參三;Protopanaxatri
棲熱菌Thermus│sp. 質量規(guī)格：≥98%,BR原Ⅱ試劑盒原人參二;Protopanaxdiol
臺盼藍染色液中國克魯維酵母 6-水楊重組人脂肪因子
黃色短桿 N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙酰基殼六糖成纖維生長因子13
猴頭 制霉藥敏紙片補體C5轉化
金黃殼囊孢 氨芐青霉藥敏紙片特異性IgG抗體
貝雷絲孢酵母 異鋁KI67抗原
球孢白僵 丁香連氮β肌動蛋白
總狀毛霉 大孔樹脂XDA-1β肌動蛋白
沼澤紅假單胞 D-腺病抗體
大腸埃希氏 愈創(chuàng)木酚支原體
溶桿 鄰苯二甲核因子κB抑制物激
串珠鐮刀 羊毛脂總膽固
氧化微桿 雙酚 白介13
核青霉 高效氟菊酯凝血
類芽孢桿 環(huán)沙星FAT4
明尼蘇達被毛孢 鄰苯二甲二癸酯高分子量脂聯
