SOCE抑制劑正在熱銷的產(chǎn)品：mTOR(Mammalian target of rapamycin) 雷帕霉靶蛋白羥纖維 USP級(jí)
Muc-1/CD227 gen (mucin-1) 粘蛋白-1/上皮膜抗原羥纖維 80～125mpa.s，25℃
MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓樣分化蛋白抗原羥纖維 3400～5000mpa.s，25℃
PM
產(chǎn)品介紹:
SKF-96365是SOCE的抑制劑，能夠在結(jié)直腸癌細(xì)胞里通過(guò)引起細(xì)胞周期阻滯和凋亡，表現(xiàn)抗腫瘤活性。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：130495-35-1 純度：99.73% 分子量：402.91 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱：SOCE抑制劑
英文名稱：SKF-96365 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10570
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
皺褶莫氏黑粉菌Snail蛋白抗體Anti-NPM1 Antibody母系蛋白4(MATN4)
費(fèi)氏中華根瘤菌分泌凋亡相關(guān)蛋白1抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白3(MATN3)
扭曲毛殼肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體Anti-NPM2 Antibody母系蛋白2(MATN2)
大腸埃希菌線粒體載體腺核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白1(MATN1)
鏈格孢Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體Anti-NPPA Antibody墨蝶呤還原(SPR)
糞腸球菌第10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框27抗體Anti-NPM1 Antibody(PB0329)末端脫氧核糖核轉(zhuǎn)移(DNTT)
擬青霉5-羥色受體2A抗體Anti-NPPA Antibody末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)
葛藤根瘤菌5-脂氧合抗體Anti-NPPA Antibody膜突蛋白()
赭曲霉SH2B蛋白抗體Anti-NPPB Antibody膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)
枯草芽孢桿菌核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體Anti-NPR1 Antibody膜聯(lián)蛋白A9(ANXA9)
斯氏土地桿菌磷化類固受體輔助活化因子-3Anti-NPS Antibody膜聯(lián)蛋白A8(ANXA8)
毛栓菌磷化血清應(yīng)答因子抗體Anti-NPY1R Antibody膜聯(lián)蛋白A7(ANXA7)
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NPY Antibody(PB0319)膜聯(lián)蛋白A6(ANXA6)
土生叢毛單胞菌磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NQO1 Antibody膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)
磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NR1H2 Antibody膜聯(lián)蛋白A4(ANXA4)
聚酵芽孢桿菌磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NR1H3 Antibody膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3)
腫瘤/睪丸抗原135抗體Sphingomonasdokdonensis人臍靜脈平滑肌細(xì)胞提取物
骨誘導(dǎo)因子抗體Herpetosiphonaurantiacus人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體檸檬泛菌人食管平滑肌細(xì)胞提取物
耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體Chryseobacteriumlathyri人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物
SOCE抑制劑粟酒裂殖酵母 2,5-二溴-3-十二烷基噻吩鈣調(diào)磷
光硬皮馬勃 1-芐基-3-活化T核因子
路普康湖冷桿 二氧化硅微管相關(guān)蛋白輕鏈3II
指狀青霉 二氧化硅腎損傷因子1
Paraconiothyrium hawaiiense Fmoc-Lys(Dnp)-OH色P450
串珠鐮孢 3--2-氟吡啶氨基
白地霉 （環(huán)基）三苯基溴化膦脂肪
耐久腸球 3-(2-氟苯基)-3-氧代-乙酯卵黃生成
科恩根霉 Fmoc-O-磷基-L-酪CD80分子
固氮 -3-乙CD86分子
枯草芽孢桿 四丁基氫氧化,30水Ⅸ
釀酒酵母 順-1,4-二-2-三磷鳥(niǎo)
人參土成對(duì)桿 1-叔丁氧羰基-4-甲氨基乙
節(jié)桿 2-溴-5-氟3-甲基
枯草芽孢桿 阿齊沙坦λ干擾
