操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Pazopanib Hydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | FS-X10750 |
產(chǎn)品介紹:
Pazopanib Hydrochloride(GW-786034)鹽酸鹽是多靶點(diǎn)抑制劑,對(duì)VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,PDGFR,F(xiàn)GFR,c-Kit和c-Fms的IC50分別為10nM,30nM,47nM,84nM,74nM,140nM和146nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):635702-64-6 別名:GW786034 純度:99.92% 分子量:473.98 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
多主葡萄殼菌乙酰羧化Anti-GNG5 Antibody人膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)
聚生殼菌堿性磷Anti-GNG5 Antibody人膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)
疏毛盤多毛孢α1性糖蛋白1/類粘蛋白1Anti-GNPDA1 Antibody人原激活肽(TAP)ELISA
棕色固氮菌 水通道蛋白-5抗原Anti-GNL3L Antibody人原激活肽(TAP)ELISA
光帽鱗傘糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽Anti-GNRH1 Antibody人α1性糖蛋白(α1-AGP)
皮膚皮狀新絲孢酵母β淀粉樣肽25-35/Aβ25-35/Amyloid β (25-35) (多肽)Anti-GORASP2 Antibody人α1性糖蛋白(α1-AGP)
鞘桿菌屬β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)Anti-GOLT1A Antibody人內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
擬枝孢鐮孢甲胎蛋白多肽Anti-GORASP2 Antibody人內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
尖孢鐮刀菌人甲胎蛋白多肽Anti-GOSR1 Antibody人二(MDA)
Glaciimonasβ淀粉樣肽1-40(結(jié)構(gòu)改造)Anti-GP1BA Antibody人二(MDA)
異常漢遜酵母異常變種β淀粉樣肽29-42(野生型)Anti-GOSR2 Antibody人胰淀(Amylin)
聚生殼菌蛇巴曲Anti-GP1BA Antibody人胰淀(Amylin)
三亞布勒擔(dān)子酵母溴脫氧尿Anti-GP5 Antibody人血管活性腸肽(VIP)
桃色青霉β淀粉樣肽29-40(野生型)Anti-GPAT3 Antibody人血管活性腸肽(VIP)
玫瑰單胞菌三磷腺結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2Anti-GPAT3 Antibody人膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
棘孢木霉 β淀粉樣肽(1-16)多肽Anti-GPC3 Antibody人膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體球型芽孢桿菌外周血B細(xì)胞白血病細(xì)胞
絲/蘇蛋白激SRPK7抗體糞產(chǎn)堿菌人肝癌細(xì)胞耐藥株
磺基葡糖硫胺抗體微黃八疊球菌大鼠組織胰腺、胰島細(xì)胞瘤
免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體莢膜紅細(xì)菌人低分化肺腺癌細(xì)胞
VEGFR/PDGFR/FGFR抑制劑尖孢鐮刀 月示胨酰基甘油-3-磷?;D(zhuǎn)移6
慢生根瘤 魚蛋白胨肺炎支原體抗體
擴(kuò)展食烴 DMEM高糖(不含紅)三磷腺
泡盛曲霉 基溴硅烷過氧化物
Rosetta(DE3) 示蛋白胨S-腺蛋
腸膜明串珠 乳蛋白水解產(chǎn)物s腺同型半胱
梭 氟甲基-1,1,1,3,3,3-六氟異基5-甲基四氫
生活飲用水大腸埃希氏質(zhì)控樣品 中性大豆蛋白胨DNA甲基化轉(zhuǎn)移
枯草芽孢桿 2-甲氧基-3-甲基吡維生B16
黏液桿 水解酪蛋白(酪蛋白氨基)I型膠原
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 3-苯甲環(huán)磷鳥
馬賽 麥芽提取物25羥基維生D3
猴頭 細(xì)學(xué)蛋白胨腺病
德里腐霉 異苯磺酰酯跳躍病
類芽胞桿屬 脫脂奶粉視黃脂