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產(chǎn)品名稱:CarE羧酸酯酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63432
商品介紹:
測定意義 哺乳動物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲氨酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解,但不能催化水解乙酰膽堿及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運輸和代謝,并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān),有機磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE活性。 測定原理: CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計算CarE活性。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
兔表皮轉(zhuǎn)谷酰(TGM3)試劑盒Anti-ACTN3 Antibody陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體
兔基質(zhì)金屬蛋白-10(MMP-10)試劑盒Anti-ACVR2A Antibody陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3抗體
兔纖維母表面抗原(FSP)試劑盒 Anti-ACTN3 Antibody(PB1079)催產(chǎn)受體(縮宮受體)抗體
兔白介12(IL-12)試劑盒Anti-ACTN4 Antibody緊密連接蛋白抗體
兔磷脂酰肌特異性磷脂Cγ2(PLCγ2)試劑盒Anti-ACVR2B Antibody卵巢癌反應抗原抗體
兔分泌粒蛋白II (SCG2)試劑盒Anti-ADA Antibody大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體
兔凝溶膠蛋白(GS)試劑盒 Anti-ADA Antibody神經(jīng)叢蛋白B1抗體
兔膠原II(Collagenase II)試劑盒 Anti-ADA Antibody(PB0960)磷化蛋白激C(T410)抗體
兔腦環(huán)指蛋白(BFP)試劑盒Anti-ADAM10 Antibody磷化蛋白激C mu型抗體
兔絲蛋白8(PRSS8)試劑盒Anti-ADAM15 Antibody磷化蛋白激C mu型抗體
兔腺苷環(huán)化相關(guān)蛋白1(CAP1)試劑盒 Anti-ADAM17 Antibody表面受體PILRβ抗體
兔多巴β羥化(DβH)試劑盒 Anti-ADAM17 Antibody前列腺癌相關(guān)蛋白4抗體
兔Slit同源物2(Slit2)試劑盒Anti-ADAM10 Antibody線粒體導肽水解β抗體
兔二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒Anti-ADAM19 Antibody富含脯蛋白15抗體
兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒 Anti-ADAM15 AntibodyK依賴的蛋白C輕鏈抗體
CarE羧酸酯酶檢測試劑盒微量法胰高血糖樣肽-2抗體Human USP49 ELISA Kit大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)Elisa測定試劑盒
甘受體alpha 1/2/3型抗體Human USP5 ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)Elisa測定試劑盒
抑制型G蛋白α3抗體Human USP50 ELISA Kit雞抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)Elisa測定試劑盒
促性腺釋放受體抗體Human USP53 ELISA Kit雞5核苷(5-NT)Elisa測定試劑盒
生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體Human USP9X ELISA Kit兔尿激型纖溶原激活物(uPA)Elisa測定試劑盒
GATA結(jié)合蛋白3抗體Human USP35 ELISA Kit抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗體流式組化 Anti-AhDMT 1
粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human USP36 ELISA Kit激活受體2A/激活受體相互作用蛋白2a抗體流式組化
骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體Human USP37 ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體流式組化