MNK1和MNK2抑制劑(eFT508)正在熱銷的產(chǎn)品：CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子苯酯 98%
CSIG(cellular senescence inhibited gene) 衰老抑制因抗原-2,2,2-三酯 97%
Cripto-1(N-Terminus) 畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關(guān)肽)N端-2,2,2-
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：eFT508 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg eFT508是一種高效，高選擇性，可MNK1和MNK2抑制劑，其IC50值均為1-2nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1849590-01-7 純度：99.49% 分子式：C??H??N?O? 分子量：340.38 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱：MNK1和MNK2抑制劑(eFT508)
英文名稱：eFT508
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10529
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種環(huán)指蛋白22抗體Anti-IRF8 Antibody絲裂原激活蛋白激8(MAPK8)
大腸埃希氏菌糖原生成相互作用蛋白抗體Anti-IRF4 Antibody(PB0220)絲裂原激活蛋白激7(MAPK7)
紫蓋蜜環(huán)菌環(huán)指蛋白89Anti-IRF5 Antibody(PB0689)絲裂原激活蛋白激14(MAPK14)
地衣芽孢桿菌谷酰轉(zhuǎn)2抗體Anti-IRF9 Antibody絲裂原激活蛋白激11(MAPK11)
帶化紅球菌T淋巴膜蛋白4抗體Anti-IRS1 Antibody絲聚蛋白2(FLG2)
球孢白僵菌磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-ISG15 Antibody絲聚蛋白(FLG)
黃色籃狀菌磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-IRS1 Antibody絲甘蛋白聚糖(SRGN)
交角耳磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-IRS2 Antibody絲蛋白Cγ(FLNC)
木耳脫氫膽固還原14抗體Anti-ISG15 Antibody絲蛋白Bβ(FLNβ)
葉點(diǎn)霉菌甲狀腺結(jié)合球蛋白抗體Anti-ISL1 Antibody絲組合因子5(SERINC5)
玫煙色棒束孢轉(zhuǎn)導(dǎo)β1X連鎖蛋白抗體Anti-ITGA1 Antibody絲組合因子4(SERINC4)
枯草芽孢桿菌內(nèi)皮B受體抗體Anti-ITCH Antibody絲組合因子3(SERINC3)
樟疫霉轉(zhuǎn)導(dǎo)β1X連鎖受體蛋白1抗體Anti-ITCH/AIP4 Antibody絲組合因子2(SERINC2)
平菇甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體Anti-ITGA1 Antibody絲組合因子1(SERINC1)
熒光假單胞菌磷化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體Anti-ITGA2B Antibody絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移長鏈堿性亞基3(SPTLC3)
鹽水海桿狀菌抑癌基因5抗體Anti-ITGA1 Antibody絲消旋(SRR)
溶質(zhì)載體家族39成員11抗體鼠乳桿菌小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞
SAMD9蛋白抗體致病性大腸埃希氏菌小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
染色質(zhì)組裝因子1P155抗體假單胞桿菌小鼠角膜上皮細(xì)胞
SARM1蛋白抗體雪腐鐮刀菌（斜面）小鼠角膜成纖維細(xì)胞
MNK1和MNK2抑制劑(eFT508)魯氏毛霉 異基 β-D-硫代吡喃葡萄糖半胱蛋白12
淺黃色假單胞 N-乙酰-D-谷半胱蛋白3
絲球毛霉 2-甲基-3-乙半胱蛋白8
pOJ260 苯并［g,h,i］芘半胱蛋白9
藍(lán)微褐鏈霉 Pramipexole 2HCl Monohydrate表皮生長因子
灰黃青霉 2-氨基苯頻哪酯二
費(fèi)氏中華根瘤 3-喹啉二酰
高山被孢霉 4-氟-2-甲氧基苯甲補(bǔ)體蛋白3
曲霉 1-Cbz-4-酮補(bǔ)體蛋白4
釀酒酵母 叔丁鋰超氧化物歧化
聚生殼 2-芐氧基苯傳染性法氏囊病病抗體
新城疫病 2,6-二氟雌二
細(xì)鏈格孢 2,6-二氟芐基雌
pME6032 4-溴-3-甲氧基苯促卵泡
死亡谷芽孢桿 4,4-二三聯(lián)苯促腎上腺皮質(zhì)
