特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
長鼻分咽線蟲PCR熒光定量檢測試劑盒 | Dispharynx nasutaPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6661 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
培養(yǎng)基P Medium P (Reinfored medium for clostridia) 250g
25g L- 胺 L-Glutamine 室溫干燥保存
100mL 超級雜交液A(不含甲酰胺) SuperHyb Solution -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Necdin
250mL Elution Buffer,pH8.0 Elution Buffer,pH8.0 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白3(TAB3)ELISA試劑盒
250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X 常溫保存
2 ug pTaq pTaq 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 人神經(jīng)調(diào)制蛋白(Neuromodulin)ELISA試劑盒
1mL 牛血清γ球蛋白標準品,2mg/mL Bovine γ IgG Standard -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Calcium/calmodulin-dependent 3', 5'-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C
50T 幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人核連蛋白2ELISA試劑盒
0.5mL dNTP溶液(標記專用) dNTP for Labeling -20℃保存 0.312-20 ng/mL 豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
2 ug pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean (1775 ng) pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean (1775 ng) 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 前列腺素E2(Prostaglandin E2)ELISA試劑盒
10次 DNA 5’末端標記試劑盒 DNA 5’ End-Labeling Kit -20℃保存李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(MMA) 進口、國產(chǎn)Modified Mcbride Agar Base用于單增李氏菌選擇性分離(SN標準)250
長鼻分咽線蟲PCR熒光定量檢測試劑盒燈盞花甲素標準品分子式: C21H18O11 英文名: Apigenin-7-O-glucronide 分子量: 446.36 號: 29741-09-1 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
燈盞花乙素甲酯標準品分子式:C22H20O12 英文名:Scutellarin methylester 分子量:476.39 號:119262-68-9 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
環(huán)氧木香內(nèi)酯標準品分子式:C15H20O4 英文名: 分子量:264.32 號:1343403-10-0 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
氧化白藜蘆醇標準品分子式:C14H12O4 英文名:4-[2-(3,5-dihydroxyphenyl)ethenyl]benzene-1,3-diol 分子量:244.24 號:29700-22-9 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
柯伊利素-7-O-葡萄糖苷標準品分子式:C22H22O11 英文名:Chrysoeriol 7-O-glucoside 分子量:462.40 號:19993-32-9 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
蒜黎蘆堿標準品分子式:C27H39NO3 英文名:Jervine 分子量:425.6 號:469-59-0 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
車葉草苷標準品分子式:C18H22O11 英文名:Asperuloside 分子量:414.36 號:14259-45-1 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
連翹酯苷E標準品分子式: C20H30O12 英文名: Forsythoside E 分子量: 462.44 號: 93675-88-8 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)
β-欖香酮酸標準品分子式:C30H46O3 英文名:β-EleMonic acid 分子量:454.68 號:28282-25-9 檢測方式:高效液相色譜法HPLC≥98% 規(guī)格:20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據(jù)客戶需求包裝)